Foundation à moitié Stuart, préparation et utilisations

Il À moitié Stuart C'est une gélose semi-solide ou un bouillon sans nutriments, utilisé pour le transport d'échantillons biologiques. Son objectif est de garder les souches présentes dans l'échantillon viable pendant un certain temps, mais sans augmenter la population microbienne.

Il a été créé par Moffet, Young et Stuart en 1948 et par la suite modifié par Toshach et Patsula. Il est composé de glycéophosphate de sodium, de tioglycoate de sodium, de chlorure de calcium et d'agar. Ce dernier est présent dans le milieu semi-solide et absent dans le liquide. Certains laboratoires ajoutent du bleu de méthylène.

Culturette avec transport Stuart. Source: par: CDC / DR. Gilda Jones, courtoisie: bibliothèque d'images de santé publique

Ils sont généralement utilisés lorsqu'il n'est pas possible de semer l'échantillon immédiatement. Dans ce cas, l'échantillon est placé aux moyens de transport, alors qu'il est transféré au laboratoire qui traitera la récolte.

De cette façon, il est garanti que les micro-organismes présents restent en vie jusqu'à ce qu'ils soient inoculés dans les médias culturels correspondants.

Initialement, son utilisation était destinée à transporter des échantillons urétraux ou vaginaux où la présence de Neisseria gonorrhoeae. Par la suite, ils ont réalisé que leur utilité pourrait être plus large.

Le support Stuart s'est avéré très efficace dans la préservation de micro-organismes labiles et ennuyeux tels que Neisseria méningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, entre autres. En plus des autres micro-organismes non-analysants tels que les entérobactéries.

Le milieu Stuart évite essentiellement la dessiccation de l'échantillon, maintient l'équilibre osmotique et conserve les micro-organismes à un pH idéal. D'un autre côté, stratégiquement ce milieu ne contient pas de nutriments, cela empêche les micro-organismes de multiplier.

Sur le marché, il existe des spectacles spéciaux pour transporter des échantillons qui contiennent ce moyen ou d'autres moyens de transport, appelée Culturette. Ils peuvent également être préparés en laboratoire.

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Base

La fin des moyens de transport Stuart est de garder les échantillons le plus proche de son état d'origine, jusqu'à ce qu'il soit traité.

Le glycéophosphate de sodium et le chlorure de calcium sont un système tampon qui agit en maintenant le pH et l'osmolarité.

Tandis que le tioglycate de sodium agit comme un agent réducteur et, dans le cas de contenir, cela lui donne la cohérence semi-solide, pour retarder l'oxygénation de l'environnement. Enfin, le bleu de méthylène est un indicateur d'oxydation, c'est-à-dire qu'il détecte la présence d'oxygène.

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Le milieu semi-solide avec indicateur redox est idéal pour le transport d'échantillons où la présence de bactéries anaérobies est suspectée.

Caractéristiques des moyens de transport

Le support Stuart, comme tous les moyens de transport, répond à certaines caractéristiques, notamment:

-Maintenir viable les souches microbiennes présentes sans multiplier.

-Il ne contient pas de nutriments; Ses composés visent à maintenir l'échantillon hydraté, dans des conditions adéquates de pH et d'osmolarité.

-Inhibe l'autolyzé de certains micro-organismes délicats, comme Pneumococcus.

-Son utilisation est temporaire, elle ne doit pas être trop étendue.

préparation

Demi-semi-solide Stuart avec indicateur redox

Préparation maison

Ingrédients

Glycéophosphate de sodium 10 gr

Tioglycoate de sodium 1.0 gr

Chlorure de calcium 0.1 GR

Bleu méthylène 0.002 GR

Agar -agar 3 gr

Eau distillée 1 L

Mélanger les composants et chauffer jusqu'à la solution totale. Verser des tubes ou des escobillones spéciales. Ils sont introduits dans l'autoclave et stérilisés à 121 ºC pendant 15 minutes. Laissez les tubes refroidir verticalement (sous la forme d'un taco). Chambre à température ambiante.

Préparation avec moyen commercial

Peser 14,1 GR du milieu dans 1 litre d'eau distillée. La chaleur agit souvent jusqu'à sa dissolution totale, vous pouvez la laisser bouillir. Le reste de la procédure comme déjà décrit.

Le milieu déshydraté est crème et préparé doit être bleu à sa surface. Cela est dû à la présence de bleu de méthylène.

Le pH du milieu doit être ajusté à 7,4 ± 0,2

Stuart liquide à moitié modifié (préparation maison)

Ingrédients

Glycéophosphate de sodium 10 gr

Tioglycoate de sodium 1 gr

Chlorure de calcium dihydraté 0,1 gr

1000 ml d'eau distillée

Il porte les mêmes ingrédients que le semi-solide, mais il ne porte pas d'agar ou de bleu de méthylène. Dans ce cas, les composants sans chauffage sont mélangés et 0,5 ml est distribué dans 16 x 125 mm de tubes avec un couvercle fileux.

Il stérilise en autoclave à 121 ° C pendant 10 minutes. Pour l'échantillon de prise -sam.

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Les tubes sont stockés à température ambiante.

Applications

Commercialement, il existe des appareils spéciaux pour transporter des échantillons appelés Culturette; Cet appareil est un tube allongé et mince qui apporte un écouvillonnage à l'intérieur et à la fin il y a un segment qui contient le milieu Stuart à moitié ou liquide ou liquide.

L'appareil s'ouvre et avec l'écouvillon prend l'échantillon. Ensuite, il est à nouveau introduit dans le tube jusqu'à ce que la pointe de l'écouvillon soit insérée dans le milieu du transport semi-solide; Certains apportent une éponge de polyuréthane imprégnée de milieu Stuart liquide, avec lequel l'échantillon est conservé lorsqu'il reste humide.

Dans le cas où la présence de micro-organismes délicats est suspecté, les cautionnements en coton avec du charbon dans l'échantillon doivent être utilisés.

Les échantillons qui peuvent être prélevés avec des écouvillons ou des balais et transférés dans ce milieu sont des exsudats pharyngés, des écouvillons rectaux et diverses sécrétions, notamment: vaginal, uréthral, ​​blessures, oculaire, otique et abcès.

Pendant le transfert de l'échantillon aux moyens de transport vers le laboratoire, la soumission de l'environnement à des conditions environnementales extrêmes (très froides ou très chaleureuses) doit être évitée (très froide ou très chaleur). Des changements soudains de pression atmosphérique doivent également être évités.

Le temps où le support est capable de garder un micro-organisme viable dépendra de la souche en question. Par exemple, pour les micro-organismes du genre, Neisserias et Haemophilus peuvent être maintenus viables jusqu'à 24 heures, mais des souches comme Salmonella ou Shigella peuvent durer les jours et jusqu'à des semaines.

S'il est estimé que le traitement des échantillons peut prendre plus de 4 jours, il est préférable de geler l'échantillon à -70 ° C.

Identification des échantillons au moyen de transport

Les supports de transport préparés ou la culture commerciale doivent avoir une étiquette où les données suivantes seront placées:

Nom et nom de famille du patient: Évitez l'échantillonnage de la confusion.

Numéro d'identification: Il est pratique de passer une commande au travail.

Source d'échantillon: Aidez le bactériologiste au choix des médias de culture appropriés.

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Traitement du médecin: Parfois, c'est nécessaire pour d'éventuelles consultations.

Date et heure de l'échantillon: Il est nécessaire pour l'acceptation ou le rejet de l'échantillon en fonction du temps écoulé entre l'échantillon et la réception en laboratoire.

Les autres informations qui seraient très utiles à annexer est:

Le diagnostic présumé: Guide dans l'ajout de médias de culture spéciale en fonction des soupçons diagnostiques.

Traitement antibiotique: Il est utile d'être attaché à l'antibiogramme.

Toutes ces informations sont essentielles pour garantir le bon traitement de l'échantillon.

Contrôle de qualité

Pour évaluer le fonctionnement du milieu Stuart, vous pouvez inoculer les souches connues et maintenues à 25 ° C, comme: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria Meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Dans tous les cas, il devrait récupérer le micro-organisme en question, conservé pendant 24 heures.

D'un autre côté, d'autres souches telles que: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 et Escherichia coli ATCC 11775.

Dans tous les cas, une reprise abondante est attendue jusqu'à 96 heures.

Limites

Certaines études garantissent que le glycéophosphate présent dans le milieu Stuart peut être métabolisé par certains coliformes, entre autres bactéries à Gram négatif et donc se multiplier dans ce milieu.

Ce risque augmente plus le traitement de l'échantillon est retardé. De même, l'exposition du milieu Stuart à des températures élevées pendant son transfert influence ce.

Les références

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