Caractéristiques du bleu lactophénol, composition, préparation, utilisations

Il lactophénol bleu ou le bleu de coton est une préparation avec des propriétés de coloration simples. Il est utilisé dans les laboratoires cliniques pour colorer principalement les structures fongiques telles que les hyphes, les tubes germinatifs et les spores.

Aide au diagnostic présumé ou préliminaire de certains champignons, cependant, il est toujours conseillé de renforcer le diagnostic avec des tests plus spécifiques, tels que des tests biochimiques ou sérologiques.

Représentation graphique du colorant de lactophénol bleu, frottis teint avec du bleu lactophénol, préparation montée au microscope. Source: images du domaine public.net / https: // www.Youtube.com / watch?v = p-kiffz7nvu / https: // www.Youtube.com / watch?V = wsz77t5l6e8

Le bleu de lactophénol est composé d'acide lactique, de bleu d'aniline, de glycérine, de fenol et d'eau déionisée. Il peut être préparé en laboratoire ou peut être acheté prêt à l'usage. Une fois préparée, il est prêt à être utilisé, il ne doit en aucun cas être dilué, car cette action donnera des résultats moche.

La concentration de ses composants rend idéal pour teindre les structures fongiques, car le phénol élimine le microbiote bactérien l'accompagnement, tandis que l'acide lactique génère un film de protection autour de la structure fongique. Enfin, Anilina Blue a une affinité pour respecter les structures de champignons.

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Base

Avec le bleu lactophénol, une coloration simple des structures fongiques d'une certaine culture mycologique est effectuée. Il est appelé simple car il utilise un seul colorant.

Le bleu de lactophénol en dehors de la dyuration, agit également comme un échantillon de clarification, grâce à l'action articulaire de l'acide lactique et du phénol, en plus le phénol se comporte comme un mordant et évite en même temps la lyse du micro-organisme en inhibant les enzymes hydrolytiques qu'ils peut être présent.

Tandis que l'acide lactique préserve la morphologie des structures fongiques.

D'un autre côté, Anilina Blue a la propriété d'adhérer ou de regarder les structures contenant de la chitine. Les structures sont teintes en bleu clair.

Il convient de noter que la paroi cellulaire des micro-organismes fongiques, en particulier les moules, contiennent de la chitine, c'est pourquoi ce colorant est idéal pour la teinture de ces micro-organismes.

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Caractéristiques

La solution bleu lactophénol est une coloration aqueuse et fortement acide, apparence légèrement nuageuse, couleur bleu clair. Il reste stable s'il est protégé entre 15 ° C et 25 ° C. La bouteille doit être maintenue correctement fermée. Il est irritant et corrosif pour la peau et les muqueuses.

Composition

La formule pour préparer un litre de bleu lactophénol est la suivante:

-250 g / L d'acide lactique

-1.0 g / l de bleu d'aniline ou de bleu méthylique

-500 g / L de glycérine

-250 g / L de phénol

-250 ml d'eau déionisée ou distillée.

Le phénol dans l'eau précédemment débrouillée est dissous. L'acide lactique et la glycérine sont ajoutés et se mélangent très bien. Enfin, le bleu de l'aniline se dissout. Mélanger à nouveau et est prêt à l'emploi.

Les parties pour préparer 80 ml de solution de bleu lactofénol sont:

-Crystaux de phénol 20 g

-20 ml d'acide lactique

-40 ml de glycérine ou de glycérol

-20 ml d'eau distillée.

Utiliser

Il est utilisé pour teindre les structures fongiques et, à travers les caractéristiques morphologiques observées au niveau microscopique, pour pouvoir faire un diagnostic présumé du champignon.

Procédure

Coloration des structures de culture fongiques

- Une culture pure du champignon est prise à laquelle ils veulent observer leurs structures.

- Il fonctionne de préférence dans une cloche d'écoulement laminaire, ou sous le briquet, en utilisant le taraudage et les gants, car il faut l'opérateur.

- Dans une glissière, une goutte de bleu lactophénol est placée.

- Un carré de ruban adhésif de bonne qualité est coupé et adhère soigneusement à la fin de la poignée en platine déjà stérilisée et froide.

- La poignée de platine approche la partie la plus superficielle de la colonie fongique et touche très soigneusement la récolte, exactement où se trouve la pâte du ruban adhésif.

- Ensuite, il prend la diapositive et placé juste sur la goutte du bleu de lactophénol, en prenant soin que la bande est parfaitement étendue et lubrifiée avec le colorant. Très délicatement la poignée en platine est supprimée.

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- Une autre goutte de bleu de lactophénol sur la bande est placée et sur le dessus. Pas trop de pression doit être exercée afin de ne pas détruire les structures champignons, car ce sont extrêmement fragiles. Le colorant doit être laissé environ 3 à 4 minutes.

- Après ce temps, la préparation est prête à être observée au microscope croissant 10x ou 40X. Si une observation de 100x est nécessaire, l'huile d'immersion doit être utilisée.

- Les structures de champignons sont généralement de la couleur bleue observée, à l'exception des champignons dématiacs qui conserveront leur caractéristique de couleur brune de ce type de champignons.

Tinion d'échantillons biologiques directs

Si un échantillon biologique direct est requis, comme les expectorations, le pus, les exsudats, les sécrétions, entre autres, ils doivent avoir une procédure de déshabitation préalable de l'échantillon. La solution NaOH est utilisée pour cela.

En cas d'échantillons de cheveux, ceux-ci peuvent être teints directement.

Plusieurs cheveux touchés (10 au total) des blessures présumées de Tña Capitis (zones allopéiques) sont prises et placées sur une diapositive (3 à 4 cheveux par diapositive). Au-dessus de quelques gouttes de bleu lactophénol et immédiatement recouvertes d'une couverture.

Prenez la diapositive avec une pince doucement sur un briquet. Pour ce faire, faites 3 à 4 passes rapides pour la flamme. Regardez le microscope en 40X et recherchez des spores à l'extérieur ou à l'intérieur des cheveux (Ectothrix ou Endothrix respectivement). Si nécessaire, placez l'huile d'immersion et observez en 100x.

Coloration du tube germinatif dans l'identification de Candida albicans

Après avoir incubé la culture présumée de Candida albicans Dans le sérum humain pendant 2 à 4 heures à 37 ° C, une partie de la solution est prise et colorée avec du bleu de lactophénol. La préparation est observée au microscope 40x. Le tube germinatif est présent et les blastosporas sont teintes en bleu vif.

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Feuille de sécurité en lacofénol

La National Fire Protection Association (NFPA), établit la feuille de sécurité des substances chimiques concernant le risque qu'il représente selon plusieurs aspects, ceux-ci symbolisent par un losange de couleurs et un nombre qui va de 0 à 4.

Le risque pour la santé est identifié en bleu, en inflammabilité en rouge, en instabilité ou en réactivité jaune et un danger blanc spécial.

Santé

Le risque pour la santé présenté par le bleu lactofénol selon la NFPA est le niveau 3. Cela signifie que la substance est extrêmement dangereuse lorsqu'elle est ingérée ou est en contact direct avec la peau ou les muqueuses.

C'est une substance hautement corrosive et irritante.

Lors du contact avec la peau et les muqueuses provoquent de graves brûlures.

Si ingéré peut provoquer des maux de tête, de la confusion, de la léthargie, de l'inconscience, de l'arrestation respiratoire et même de la mort.

Inflammabilité

Selon NFPA, le bleu de lactophénol est classé au niveau 1 en termes d'inflammabilité. Cela signifie qu'il ne fait de la combustion que s'il est chauffé au-dessus de 94 ° C.

Instabilité

Catalogué selon le NFPA au niveau 0 (zéro) en termes de réactivité. Cela signifie qu'il n'a aucun risque de réactivité, c'est-à-dire qu'il s'agit d'une substance chimiquement stable.

Dangers spéciaux

Il n'offre pas de dangers spéciaux supplémentaires.

Les références

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