Gélose de Salmonella-Shigella

Il Gélose de Salmonella-Shigella Également connu sous le nom d'agar SS, il s'agit d'un milieu modérément sélectif et différentiel, spécialement conçu pour l'isolement des bactéries entéropathogènes des genres Salmonella et Shigella, à la fois d'échantillons environnementaux et cliniques.

L'agar SS a une composition complexe; Il se compose d'extrait de viande, de peptone, de lactose, de sels biliaires, de citrate de sodium, de thiosulfate de sodium, de citrate ferrique, d'agar, rouge neutre, vert brillant et eau distillée. Compte tenu de sa grande sélectivité, les échantillons peuvent être semés avec une flore mixte abondante.

Agar SS avec des colonies Salmonella SP. Source: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // CreativeCommons.Org / licences / by-sa / 4.0)], de Wikimedia Commons

Dans les laboratoires de microbiologie, le milieu Salmonella-Shigella est largement utilisé pour étudier la présence de Salmonella et de Shigella dans des échantillons de matières fécales diarrhéiques, des eaux usées, de l'eau potable et de la nourriture.

Parfois, il est nécessaire d'utiliser des bouillons pré-enrique (bouillon de lactosado) et d'enrichissement (bouillon de sélénito cistina) pour récupérer les souches de Salmonella.

Ces étapes sont nécessaires lorsque l'existence de salmonelles est suspectée en très faible quantité, ou lorsque la souche peut être maltraitée par les processus de production industriels, principalement des aliments transformés. Il est également conseillé d'enrichir les échantillons de selles de patients qui ont été traités avec des antibiotiques.

Par la suite, le bouillon enrichi peut être semé dans une gélose Salmonella-Shigella et dans d'autres supports similaires, tels que la gélose Xilosa, Lysina Desoxicolate (XLD) et l'agar hektoen enrique (He).

Base

Chaque composant de la culture Salmonella-Shigella a une fonction spécifique, et le mélange dans son ensemble fournit les propriétés qui le caractérisent.

Pouvoir nutritionnel

L'extrait de viande et la peptone (digérés avec des tissus animaux) fournissent les nutriments nécessaires (azogens, carbone et vitamines) pour le développement de micro-organismes capables de tolérer le reste des composants.

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Cohérence

L'agar -agar est chargée de fournir une cohérence solide à l'environnement.

Sélectif

Ce milieu est très sélectif car il contient des sels biliaires, du citrate de sodium et du vert vif. Par conséquent, il inhibe la croissance de toutes les bactéries à Gram positif et de la plupart des bacilles à Gram négatif, y compris certains coliformes.

Tandis que les bactéries du genre Salmonella et certaines souches de Shigella s'ils soutiennent ces composés.

Principalement, le genre Salmonella est très résistant aux sels biliaires, à tel point qu'ils sont capables de vivre dans la vésicule biliaire de certains patients transporteurs qui expulsent constamment des bactéries par des excréments.

Différentiel

Le lactose est des glucides fermensibles qui aident à différencier les souches de fermentation du lactose de la non-fermentation. Cette propriété est mise en évidence par la présence de l'indicateur de pH, qui dans ce milieu est le rouge de Fenol.

Les souches de fermentation du lactose donnent des colonies rouges, tandis que les non-ferment sont incolores. Cette caractéristique est importante, car Salmonella et Shigella ne ferment pas le lactose.

D'un autre côté, ce milieu contient du thiosulfate de sodium comme source de sulfure et de citrate ferrique comme source de fer. Les deux composés parviennent à différencier les bactéries capables de produire du sulfure d'hydrogène. Ceux-ci réagissent pour former un précipité noir de sulfure ferrique insoluble et visible.

Cette propriété a des souches du genre Salmonella. Normalement, ses colonies sont plates incolores avec un point noir au centre du même. Le reste des salmonellas ne produisent pas h₂S et se développent comme des colonies incolores.

D'un autre côté, les colonies du genre Shigella sont plates incolores sans noircissement.

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préparation

Ce médium est très simple à préparer.

Peser 63 gr de milieu commercial déshydraté et se dissoudre dans un litre d'eau distillée. Chauffer la solution et secouer.  Le mélange peut atteindre l'ébullition pendant des minutes pendant des minutes.

Ce médium ne doit pas être automatiquement autoclavé. Après sa dissolution, il est utilisé directement sur des plaques simples ou doubles stériles.

En se solidifiant, ils sont commandés de manière inversée dans les plaquettes et sont stockées au réfrigérateur (2-8 ° C) jusqu'à utiliser.

Le milieu après préparé doit être à pH 7,2 ± 0.2 et avec un rouge orange.

Il est important de laisser les plaques se tempérer avant de semer les échantillons. L'échantillon d'origine peut être semé directement, en téléchargeant du matériel dans une partie de l'agar, puis à partir de là pour se battre par l'épuisement.

En cas de port de bouillons enrichis, passant une partie du bouillon de sélénito et des semis avec une spatule Drigalski.

37 ° C est incubé pendant 24 heures en aérobiose.

Gardez à l'esprit que la quantité de grammes malgré et le pH final du médium peut varier d'une maison commerciale à une autre. Le mal moyen apporte toujours les indications de sa préparation.

Utiliser

Il est fréquemment utilisé dans l'analyse des coproutures et dans l'étude microbiologique des échantillons d'eaux usées, des eaux de consommation et des aliments.

Des plaques doubles fréquemment sont préparées, d'un côté, la gélose Salmonella-Shigella est placée et dans l'autre gélose XLD.

Limites

-Certaines souches de Shigella ne poussent pas dans ce milieu. Par conséquent, il n'est pas recommandé pour l'isolement primaire de ce genre.

-Toutes les colonies transparentes avec centre noir ne sont pas indicatives de Salmonella; Des tests biochimiques doivent être effectués pour faire une identification correcte, car les colonies de certaines souches de protéines sont indiscernables de celles de Salmonella.

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-Le milieu déshydraté doit s'occuper de l'exposition à l'environnement, car il est très hygroscopique. Par conséquent, il doit être conservé dans un environnement sec et bien fermé. Ouvert pendant des périodes très courtes.

-Au fil du temps, les sels biliaires du milieu peuvent précipiter, formant une image similaire à une enchevêtrée à l'intérieur de l'agar, mais cela n'affecte pas les résultats.

-Certaines souches de Shigella peuvent fermenter lentement le lactose.

Contrôle de qualité

Pour prouver que le support fonctionne correctement, il est conseillé.

Pour cela, vous pouvez utiliser des souches de ET. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium soit Enterococcus faecalis.

Les résultats attendus sont:

Escherichia coli --Colonies convexes roses.

Enterobacter et Klebsiella- Grandes colonies et mucoides rouges ou roses.

Shigella flexneri --colonies plates plates ou incolores.

Salmonella typhimurium - colonies incolores avec centre noir.

Enterococcus faecalis-- Inhibition totale.

Les références

1. Laboratoires Diffco Francisco Soria Melguizo. Gélose de Salmonella-Shigella. Disponible sur: F-Soria.est
2. Laboratoire de BD. BD Salmonella-Shigella Agar. Disponible sur: BD.com