Sel d'agar et mannitol Qu'est-ce que la fondation, la préparation, les utilisations

Il Gank Sal et Manitol O Salado Manitol est un milieu de culture solide, sélectif et différentiel. Il a été créé par Chapman pour l'isolement des agents pathogènes à Gram positif, en particulier Staphylococcus aureus.

Cependant, il est également utile d'isoler Staphylococus epidermidis, qui peut parfois être présent comme un pathogène opportuniste, et Staphylococcus saprophyticus, pathogène urinaire reconnu, entre autres espèces.

POUR. Fiola avec la tête préparée de Salitol Salado. B. Plaques de gélose de Salado Manitol plantées de fermentation et de souches bactériennes non fermentaires du Manitol. Source: A et B: Photos prises par l'auteur MSC. Marielsa Gil.

Certains enterococcus sont capables de se développer dans ce milieu, ainsi que certains formateurs de spores positives de bacilles à grammes.

Ce milieu est très utile dans l'analyse des échantillons cliniques, mais est également utilisé dans l'étude microbiologique des aliments et dans le contrôle de la qualité des produits industriels, tels que les cosmétiques, les médicaments, entre autres.

L'agar salée du mannitol est composée d'extraits et de peptones de viande bovine, de tritéine, de mannitol, de chlorure de sodium, de phénol rouge et d'agar et d'agar.

Base

L'agar du Manitol est sélective grâce à la forte concentration de sel qu'il a. La salinité agit comme une substance inhibitrice et empêche la croissance des bactéries Gram négatives.

Il est également différentiel en raison de la présence de glucides du manitol et de l'indicateur de pH de pH rouge. De là, les bactéries capables de fermenter le manitol produisent des acides, acidifiant le milieu, tournant les colonies et le milieu jaune.

D'un autre côté, les colonies qui ne ferment pas le manitol poussent au milieu prenant les nutriments qui leur fournissent les extraits et les peptones de la viande et de la tripeine. À partir de là, les bactéries extraient du carbone, de l'azote, des vitamines et des minéraux nécessaires à la croissance.

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Dans ce cas, les colonies peuvent être faibles ou fortes roses, et le milieu reste de la même couleur ou des changements de fuchsia.

L'agar est la substance qui fournit la cohérence à l'environnement.

préparation

Pour préparer un litre d'agar de mannitol salé, 111 GR du milieu déshydraté de la maison commerciale de préférence et se dissolve dans 1000 ml d'eau distillée, en utilisant un correctif.

La chaleur est appliquée fréquemment en remuant les moyens d'améliorer le processus de dissolution. Est bouilli pendant une minute.

Le fixola est placé dans l'autoclave à 121 ° C pendant 15 minutes.

Une fois le temps terminé, le fixola autoclave est retiré, laissez reposer et servir entre 15 et 20 ml sur des plaques de Petri stériles lorsque la température est d'environ 50 à 55 ° C.

Il est autorisé à se solidifier, à commander de manière inversée dans les plaquettes et à garder le réfrigérateur jusqu'à son utilisation. Avant de semer un échantillon, vous devez attendre que la plaque prenne la température de l'environnement.

Les plaques sont semées par statication ou par surface plantée avec des spatules Drigalski. Le pH final du milieu préparé doit être à 7,4 ± 0,2

La couleur du milieu déshydraté est beige clair et la couleur du milieu préparé est orange rouge.

Applications

En raison de sa forte sélectivité, ce médium est idéal pour semer des échantillons avec une flore mixte dans laquelle vous souhaitez rechercher la présence de Staphylococus aureus, comme le principal pathogène de ce genre.

En ce sens, l'une de ses utilisations les plus fréquentes réside dans l'analyse microbiologique d'échantillons d'exsudats pharyngés et de sécrétion nasale, en particulier pour détecter les porteurs asymptomatiques des porteurs S. aureus.

Certains pays ont mis en œuvre cette analyse comme une exigence obligatoire pour les personnes qui souhaitent travailler en tant que Venators alimentaires.

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Ce contrôle empêche les gens de porter S. aureus, évitant ainsi qu'il y a des intoxications alimentaires massives, En raison de la consommation d'aliments contaminés par une entérotoxine staphylococcique.

Il peut également être inclus dans la plantation des infections des plaies, des hémocultures, du LCR, du lavage de la bronche alvéolaire, entre autres.

La gélose salée du mannitol est utile pour les colonies Reslar des urocultures de gélose ou d'agar sanguine dont le gramme a révélé des noix de coco gram positives en grappes.

Il est également valable dans l'analyse microbiologique des aliments, de l'eau potable, des sols, entre autres applications.

Contrôle de qualité

Une fois un boom avec une gélose salée du mannitol préparé, il est conseillé d'effectuer un contrôle de la qualité. Les contrôles sont semés pour montrer s'il y en a une croissance.

En tant que contrôle positif, vous pouvez utiliser des souches connues de Staphylococcus aureus. Il doit devenir des colonies jaunes en développement satisfaisantes, et le milieu devient également de la même couleur.

De même, il est pratique d'inclure une souche connue de Staphylococcus epidermidis. Il doit se développer de manière satisfaisante en développant des colonies roses, et les restes moyens de la même couleur ou s'assombrissent dans un rose plus fort.

Comme contrôle négatif, les souches qui ne devraient pas se développer dans ce milieu sont utilisées. Par exemple, vous pouvez semer une tension connue de Escherichia coli ou Klebsiella pneumoniae. Le résultat attendu est une inhibition complète, c'est-à-dire aucune croissance.

De plus, une assiette sans inoculation doit être incubée. Il ne devrait pas y avoir de croissance ou de changement de couleur.

Il est important que la plaque ne soit pas utilisée s'il existe des indications de détérioration, comme la pollution, la déshydratation, la décoloration, entre autres.

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Considérations finales

Lorsque vous utilisez le milieu du mannitol salé, certains aspects importants doivent être pris en considération:

-L'obtention d'une croissance des colonies jaunes n'indique pas qu'il est Staphylococcus aureus. N'oubliez pas que certaines souches d'entérococcus sont capables de grandir dans ce moyen et de fermenter le mannitol, ainsi que certains bacilles à Gram positif.

Par conséquent, il est important de faire un gramme dans la colonie et un test de catalase.

-D'un autre côté, nous devons considérer d'autres espèces de Staphylococcus différentes de aureus Ils sont également capables de fermenter le mannitol. Par conséquent, il est important de sous-culture la colonie d'un bouillon de nutriments pour prendre à partir de là et effectuer le test de coagulase.

Parmi les espèces de Staphylococcus d'une importance clinique pour l'homme qui ferment le mannitol est: S. aureus, s. Simulans, s. Capitis ssp capitis, s. capitis ssp urealyticus, s. Xylosus, s. Cohnii ssp urealyticum, entre autres.

D'autres peuvent donner une réaction variable, c'est-à-dire parfois positive et parfois négative. Quelques unes sont S. saprophyticus, s. Haemolyticus, S. Warneri, s. Intermédiaire, entre autres.

-Il n'est pas recommandé de prendre des colonies directement de l'agar du Manitol pour effectuer le test de coagulase, car la forte concentration de sel du milieu peut interférer avec le résultat.

-Enfin, il est recommandé S. aureus Ils peuvent lentement fermenter le mannitol, bien que ce ne soit pas très fréquent.

Les références

1. Laboratoires britanniques. Gélose de Salado Manitol. 2015. Disponible sur: Britanialab.com
2. Laboratoires BD. Gélose du sel de mannitol bd. 2013. Disponible sur: BD.com.