Farine de maïs. Fondation, préparation et utilisation

Il Gélose de la farine de maïs C'est un milieu de culture solide, un faible pouvoir nutritionnel, utile pour le sous-culture Candida albicans. En anglais, il est connu sous le nom de gélose de farine de maïs.

La farine de maïs moyen conventionnelle a une composition très simple, contient la semoule de maïs, l'agar et l'eau. En raison de son faible niveau nutritionnel, il est idéal pour l'utiliser dans le maintien de souches fongiques pour des périodes modérées, en particulier les champignons noirs.

POUR. Représentation graphique du complexe Candida albicans dans la gélose de la semoule de maïs. B. Clamidosporas de la vue complexe de Candida albicans au microscope, formé en farine de maïs. Source: A. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org / licences / by-sa / 3.0)] / b. Par: CDC / DR. William Kaplan, courtoisie: bibliothèque d'images de santé publique.

Sporulation complexe Candida albicans Il est favorisé dans ce milieu, si 1% de Tween 80 est ajouté lors de la préparation de l'agar. La formation de clomidospores est caractéristique de cette espèce et pratiquement la seule qui affecte l'être humain.

Il existe d'autres espèces qui forment des clomidospores, mais il est peu probable qu'elles affectent l'humain, comme Candida Australis, présent dans les excréments des pingouins, ou C. Clausenii, qui est une saprophyte rarement trouvée. De plus, exceptionnellement l'espèce C. Stellatoïde et C. tropicaux Ils pourraient les former.

D'un autre côté, l'ajout de glucose à la favette de maïs moyenne favorise la formation de pigments dans les souches de Rubrume trichophytom.

Il est important de souligner qu'il existe des champignons qui ne forment pas de Hyphaifs, ni de pseudoohifas dans la farine de maïs de crise, comme Cryptococcus neoformans, se différencier des autres genres.

L'agar de la farine de maïs peut se préparer en laboratoire ou des médias commerciaux peuvent également être utilisés.

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Base

La farine de maïs est un substrat, l'agar est l'agent de solidification et l'eau est le solvant.

La gélose de la farine de maïs peut être complétée par Tween 80 (Polyester 80 Sorbita monooolater ou polysorbate). Ce composé diminue la tension superficielle de l'environnement par sa puissance émulsifiante.

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Il crée également une atmosphère hostile qui inhibe la multiplication des cellules exagérée et stimule la croissance des hyphes, favorisant également la production de clomidospores; Ce dernier a considéré les structures de résistance. Cette structure aide à l'identification des espèces de Candida albicans.

Pour sa part, le glucose dans ce milieu augmente la capacité de formation de pigments de certains champignons.

Il convient de noter que la farine de maïs moyenne avec du glucose ne sert pas la démonstration de clomidospores en cOmplejo Candida albicans.

préparation

APAR de farine de maïs maison

Peser 47 gr de la semoule jaune et se dissoudre dans 500 ml d'eau distillée. Chauffer à 60 ºC, tandis que la préparation est agitée dans une période approximative de 1 heure. Puis filtrer à travers un morceau de gaze et de coton, éventuellement, il peut être filtré à nouveau via un papier filtre Whatman n ° 2.

Complétez le volume à 1000 ml avec de l'eau distillée. Ajouter 17 GR d'eau d'agar, chaleur à dissoudre. Autoclavar pendant 15 minutes à 121 ° C.

Servir dans des assiettes stériles de Pétri. Sauver dans un réfrigérateur.

La couleur du milieu préparé est blanchâtre avec une apparence grumeleuse.

Si vous souhaitez préparer la semoule de maïs avec du glucose à la préparation décrite ci-dessus pour ajouter 10 gr de glucose.

Gélose de la farine de maïs commerciale

Peser 17 gr du milieu déshydraté et se dissoudre dans 1 litre d'eau distillée. Le mélange peut être chauffé, en remuant doucement pour se dissoudre complètement. Stériliser en autoclave à 121 ºC, 15 lb, pendant 15 minutes.

Verser des assiettes stériles de Pétri. Laisser solidifier. Investissez et économisez dans le réfrigérateur jusqu'à utiliser. Tempérer avant d'utiliser.

Le pH doit être de 6,0 ± 0,2 à 25 ºC.

Gélose de la farine de maïs avec tween 80

Pour se conformer à la norme ISO 18416, la gélose de la semoule de maïs doit être préparée comme suit:

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Peser 65 gr par litre et ajouter 10 ml de tween 80. Chauffer et faire bouillir pendant quelques minutes jusqu'à ce que vous vous dissoliez, en prenant soin de ne pas trop surchauffer. Stériliser à 121 ºC pendant 15 minutes.

Gélose de la farine de maïs avec du glucose

Pour améliorer le pouvoir chromogène des colonies de Rubrum de Trichophyton et les différencier de T. Mentagrophytes, 0,2% de glucose à la formule d'origine peut être ajouté. Il n'a pas besoin d'avoir Tween 80, car le glucose inhibe la formation de clomidospores.

Utiliser

L'utilisation de la gélose de la semoule de maïs est principalement destinée à l'étude des souches de Candida, aidant son identification à travers l'observation caractéristique des chloispores chez les espèces d'Albicans. C'est-à-dire que l'utilisation de cette gélose sert de méthode auxiliaire pour identifier ces levures.

Dans cette gélose peut développer à la fois des espèces saprophytes et pathogènes, mais chaque forme de structures mycéliales caractéristiques. Par exemple, les espèces du genre Torulopsis ne produisent pas de mycélium et ne se reproduisent que par les blastoconidies.

De même, les espèces de Trichhosporon et de Geotrichum produisent des arthroconidies dans la farine de maïs et parfois il est difficile de distinguer l'une et l'autre.

L'arthroconidie de Genotrichum produit une extension des hyphes ressemblant à un bâton de hockey.

La production de pigments à l'aide de gélose de maïs supplémentée du glucose est également utile pour l'identification de Rubrume trichophytom.

Semé

Dans la farine de farine d'agar, les colonies suspectes de candide. Le milieu est semé et incubé à 22 ºC pendant 24 à 48 heures. Le temps d'incubation peut être prolongé si nécessaire.

Démonstration de clomidospores

À cette fin, la gélose de la farine de maïs avec Tween 80 doit être inoculée en utilisant la technique Dalmau. Cette méthode consiste à prendre avec la poignée en platine une partie de la colonie suspecte et à effectuer trois coupes parallèles au milieu en gardant la poignée à 45º. Les coupes doivent être séparées à une distance de 1 cm entre l'une et l'autre.

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Par la suite, un objet précédemment enflammé sur les vergetures semées est placé, de sorte que la moitié couverte et l'autre découverte.

Incuber les plaques plantées à 30 ° C pendant 48-72 h, puis examiner le microscope à travers les couvertures.

Entretien des souches fongiques

Pour l'entretien des souches, les plaques plantées et les inondations sont stockées au réfrigérateur (4 à 8 ºC). De cette façon, ils peuvent durer plusieurs semaines et être utilisés à des fins d'enseignement ou de recherche.

Contrôle de qualité

Pour le contrôle de la stérilité, une assiette sans inoculation à température ambiante est incubée, on s'attend à ce qu'il n'y ait pas de croissance ou de changement de couleur.

Pour un contrôle de qualité, vous pouvez semer des souches connues telles que: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus Niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Les résultats attendus sont une inhibition partielle pour S. aureus et ET. coli. Bien que une croissance satisfaisante soit attendue dans le reste des souches.

Aspergillus Niger Il pousse avec des colonies noires et sporulées en une période approximative de 5 jours d'incubation.

Candida albicans Colonies de levuriformes avec la production de clomidospores.

Saccharomyces cerevisiae produire de grandes cellules de levure.

Limites

Un précipité jaune se forme au bas de la plaque qui ne doit pas être confondu avec les colonies.

Les références

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