Composition d'huile d'immersion, caractéristiques, utilisations

Il huile d'immersion C'est un liquide visqueux et transparent qui a un indice de réfraction élevé. Pour cette raison, il est largement utilisé dans les observations microscopiques, car il fournit la propriété de concentrer la lumière lorsqu'il passe par la cible 100x du microscope, augmentant sa puissance de résolution.

Cela se produit parce qu'un film visqueux se forme entre la cible et le frottis, empêchant les rayons de lumière de se disperser lorsqu'ils atteignent l'air, concentrant les faisceaux de lumière vers l'échantillon.

GOTERO avec de l'huile d'immersion et du microscope focalisés avec une cible 100x en utilisant de l'huile d'immersion. Source: Pixabay.com

L'huile d'immersion est utilisée uniquement avec la cible 100x. C'est pourquoi l'objectif de 100x est également appelé objectif d'immersion. Le reste est connu comme des objectifs secs. Cet objectif ne peut pas être utilisé sans huile d'immersion, car sans cette visualisation ne serait pas satisfaisante.

La fonction principale de l'huile d'immersion est de fournir des images plus claires, claires et définies, permettant l'observation de détails qui ne seraient pas possibles avec d'autres objectifs.

La première huile utilisée à cet effet était l'huile d'anis, utilisée à côté de la première lentille d'immersion créée par Giovanni Battista Amici. Cela n'a fait qu'éviter l'aberration chromatique, mais n'a pas augmenté l'ouverture numérique du système d'objectif.

Ensuite, l'huile de cèdre a été utilisée, mais a présenté de nombreux inconvénients qui ont forcé sa désuétude. Parmi eux se trouvait leur grande acidité, qui a endommagé les objectifs à court terme.

Par la suite, d'autres substances telles que l'eau et la glycérine ont été utilisées jusqu'à ce que les huiles d'immersion synthétiques soient créées, qui ont été progressivement perfectionnées jusqu'à ce qu'ils atteignent l'huile d'immersion actuelle, qui est un composé complexe de substances organiques.

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Composition de l'huile d'immersion

L'huile d'immersion est constituée d'un mélange de composés organiques tels que: terphényle, térfényle hydrogéné, hydrocarbures naturels et polybétains.

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Caractéristiques d'huile d'immersion

L'huile d'immersion est un liquide jaune clair, une apparence légèrement visqueuse, une odeur et une densité caractéristiques comprises entre 0,92 et 0,99 gr / cm³.

Huile d'immersion Il n'est pas soluble dans l'eau et a un point d'ébullition de 340 ° C. L'indice de réfraction A (n ° 20 ° C / D): oscille entre 1 482 - 1 516. Alors que l'indice d'inflammation est de 110 ° C et que la viscosité varie entre 100 et 120 MPa.s.

Ce produit doit être correctement jeté, car il est écotoxique. C'est-à-dire qu'il est nocif pour l'environnement, affectant principalement les animaux aquatiques. D'un autre côté, c'est une peau irritante et des muqueuses. Si ingéré est néphrotoxique et cardiotoxique.

L'huile d'immersion est stable à 15 à 25 ° C, température à laquelle elle doit être maintenue.

Fondamentaux de l'huile d'immersion

Lorsque vous utilisez l'augmentation la plus élevée, l'intensité lumineuse doit être augmentée. Cependant, de nombreux faisceaux lumineux sont perdus car ils sont dispersés lorsqu'ils atteignent l'air (espace entre les couvercles et l'objectif), et même certains rayons subissent une réflexion totale.

L'huile d'immersion a un indice de réfraction similaire à celui du verre. Par conséquent, lorsque l'huile entre l'objectif 100x et le revêtement, les faisceaux lumineux sont contactés, les lumières sont concentrées.

Les rayons concentrés traversent l'échantillon et augmentent la netteté de l'image, c'est-à-dire que l'ouverture numérique de l'objectif augmente et corrige les aberrations chromatiques et sphériques.

Utilisations ou applications

L'utilisation de l'huile d'immersion est particulièrement nécessaire lorsqu'elle est nécessaire pour observer une image de manière plus large, en utilisant l'objectif d'une augmentation plus importante (objectif 100x) et ainsi être en mesure de voir des détails essentiels pour établir un diagnostic.

Par conséquent, il est largement utilisé dans les études microscopiques de divers domaines tels que: histologie, cytolologie, hématologie et bactériologie. Par exemple, il est utile pour l'étude des caractéristiques des cellules et des tissus d'un patient.

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Il sert également à l'analyse du frottis sanguin, où nous voulons.

Il est généralement utilisé dans des préparations fixes, car elle n'est pas recommandée dans les préparations fraîches. En effet.

En revanche, l'huile d'immersion n'est pas seulement utile en microscopie optique conventionnelle: elle est également utilisée dans les microscopes de fluorescence de la réflexion interne totale (TIRFM) et dans les applications de fluorescence confocale.

Étapes pour observer une préparation à l'aide d'huile d'immersion

Pour voir une préparation au microscope, la préparation doit d'abord être focalisée avec l'objectif de moins d'augmentation, généralement le 10x, avec peu d'intensité lumineuse.

Ensuite, il passe à la cible de 40X, et le passage de la lumière est légèrement augmenté. Certaines analyses peuvent être effectuées avec cette augmentation, mais pour voir les détails structurels, l'augmentation de 100x est nécessaire.

Avant de passer à 100x cible, une goutte d'huile d'immersion sur les couvertures est placée, juste là où vous voulez observer, et par la suite le revolver de microscope se déplace pour localiser la cible 100x dans la préparation de la préparation.

L'intensité de la lumière est régulée (augmente) (déplacer le condenseur et ouvrir le diaphragme). Ensuite, avec de petits mouvements qui sont donnés à la vis du micromètre (vers l'avant ou à l'arrière), il doit se concentrer parfaitement si le microscope utilise des objectifs paraffocaux.

Si vous essayez de concentrer la préparation directement avec l'objectif d'immersion, vous pouvez avoir des problèmes à trouver l'approche. Ce n'est pas une action impossible, mais la difficulté augmente considérablement.

Se soucier

Pour utiliser l'huile d'immersion, certaines conditions doivent être prises en compte.

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Lorsqu'une préparation colorée a été effectuée, comme un rubb. Sinon, l'huile avec l'eau formera des micelles qui ne laisseront pas la préparation à visualiser.

D'un autre côté, après avoir observé le lot de préparatifs, c'est-à-dire qu'à la fin de la journée de travail, l'objectif 100x doit être soigneusement nettoyé, en utilisant un papier pour l'objectif avec de l'éthanol. Si l'objectif sale est laissé, l'huile sèche dessus, puis il sera très difficile de le retirer, endommageant le champ de visualisation.

De même, nous devons garder à l'esprit que l'huile est inflammable et doit être loin des sources de chaleur (briquets). Il est important d'éviter de le chauffer au-dessus de 65 ° C.

Enfin, l'huile est un produit toxique. Par conséquent, contact direct avec la peau et les muqueuses, où elle peut provoquer une légère irritation. Pour éviter les accidents, il est recommandé d'utiliser des gants et des lentilles de sécurité pour le manipuler.

Dans le cas où vous avez un contact avec l'huile, la zone avec beaucoup d'eau doit être lavée. Si l'huile Spleng dans les yeux, elle doit être lavée de la même manière, en gardant les yeux ouverts. En cas d'ingestion accidentelle, il est important de manger de l'eau tiède et d'induire des vomissements, en plus d'aller chez le médecin le plus proche.

Les références

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