Hémoculture à quoi sert-elle, fondation, procédure, résultats

Il culture sanguine Il s'agit d'un test bactériologique qui cherche à détecter la présence de micro-organismes dans le sang. Le sang est un liquide stérile par nature et doit donc être maintenu dans des conditions physiologiques, de sorte que la présence de bactéries ou de champignons dans le sang est toujours pathologique.

Lorsque les bactéries ou les champignons se trouvent dans le sang, mais la multiplication ne dépasse pas l'élimination des micro-organismes par le système immunitaire, il est appelé bactériémie (pour les bactéries) ou fongémie (pour les champignons); Mais si les micro-organismes augmentent en nombre incontrôlable, il est appelé septicémie.

Bouteilles hémocultives (jaune: aérobiose pédiatrique, vert: aérobiose adulte et rouge: anaérobiose adulte). Source: Photographie prise par l'auteur MSC Marielsa Gil.

La bactériémie, les champignons et la septicémie mettent en danger la vie du patient et doivent donc être traités immédiatement. C'est pourquoi, quand il y a des soupçons d'infection dans le sang, les médecins demandent l'étude de l'hémoculture.

Cette analyse bactériologique permet de savoir s'il y a ou non une infection dans le sang et quel est le micro-organisme impliqué. De plus, si le test de sensibilité est positif pour savoir que l'antibiotique ou antifongique pourrait être utilisé dans le traitement.

Si, au contraire, l'hémoculture est négative à 24 heures d'incubation, elle ne doit pas être exclue jusqu'à ce qu'elle ne devienne 240 heures négatives. Cela garantit qu'il n'y a pas de micro-organismes à croissance lente.

Pour qu'une hémoculture soit fiable, les mesures aseptiques extrêmes doivent.

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Pourquoi est-ce?

Le sang est un liquide stérile et lorsque des micro-organismes y sont trouvés, il est à 100% pathologique. Cette situation représente une image clinique très délicate qui compromet la vie du patient.

L'hémoculture est une analyse bactériologique importante qui permet la présence de micro-organismes dans la circulation sanguine.

Les micro-organismes peuvent atteindre le sang de différentes manières, être capables d'être des infections extravasculaires telles que: pneumonie, infections intra-abdominales, pyélonéphrite, infections cutanées graves, tissus mous ou arthrite, entre autres.

Ou il peut également être par voie intraveineuse, par exemple la contamination des cathéters intraveineux ou artériels, l'endocardite, la pratique de la toxicomanie par voie intraveineuse, l'administration de médicaments ou de solutions contaminées, etc.

Détecter et traiter avec le temps l'agent causal de la septicémie est indispensable pour garantir la survie du patient.

En ce sens, le médecin doit indiquer la réalisation d'une hémoculture lors de l'observation des signes et des symptômes qui font un suspect de septicémie, comme: de la fièvre (supérieure à 38 ° C) sans un foyer contagieux apparent ou sur l'hypothermie contraire (< de 36°C).

D'autres signes peuvent être: frissons, augmentation du comptage des leucocytes (> 10.000 cellules / mm³) ou une diminution importante du polymorphonucléaire (< de 1.000 PMN/mm³). Ainsi que des détérioration multi-même ou une perte de vitalité soudainement, entre autres signes d'alarme.

La bactériémie peut être constante, transitoire ou intermittente. Ceci est important pour la prélèvement d'échantillons, car il est nécessaire de le prendre en cas de problème plus susceptible de trouver le micro-organisme qui circule.

Par conséquent, il est recommandé de prendre au moins 2 échantillons à différents endroits. De plus, l'idéal est que l'échantillon est effectué dans des pics fébriles ou lorsque le patient présente du tyritone, une hypothermie extrême, la transpiration ou la tachycardie.

Cependant, pour que l'hémoculture soit un outil vraiment utile, l'échantillon avec des soins extrêmes doit être prélevé. Une mauvaise manipulation ou une mauvaise asepsis lors de la prise de l'échantillon peut invalider le test, l'obtention de faux positifs.

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Base

L'étude consiste à prendre deux ou trois échantillons de sang de manière aseptique et à la placer dans des bouteilles spéciales.

Des dispositifs spéciaux pour la culture d'échantillons de sang sont appelés barres d'hémocultures. Ceux-ci sont classés comme:

Selon l'âge du patient

-Usage pédiatrique

-Pour adultes.

Selon le type de micro-organisme

-Bocs de micro-organismes aérobies (bactéries aérobies, bactéries et champignons facultatifs).

-Bouteilles d'hémoculture pour micro-organismes anaérobies (bactéries anaérobies strictes).

Certains contiennent un milieu de culture liquide et d'autres contiennent un milieu de culture solide et liquide en même temps. Ils existent également avec des particules de carbone activées.

Procédure

Recommandations pour l'échantillon

- L'échantillon d'être prélevé par du personnel hautement formé et formé dans la zone de microbiologie.

- Le nettoyage aseptique ou exhaustif du lieu de l'échantillon est sans aucun doute l'étape la plus importante.

- Comme tout échantillon, le personnel de santé doit être entièrement conforme aux mesures de biosécurité pendant le processus (utilisation de gants, de robes, de lentilles, entre autres).

- Faites attention que tous les outils nécessaires à l'échantillonnage sont disponibles.

- Étiquetez les bouteilles avec le nom complet du patient, la date, le numéro d'historique clinique, l'échantillon prennent du temps et du numéro de séquence de laboratoire.

-Idéalement, prélever l'échantillon avant que le patient ne commence une thérapie antimicrobienne. Il est indiqué que dans le cas que la non-opération du traitement actuel est suspectée. Dans ce cas, l'échantillon doit être prélevé avant le changement de médicament, à l'aide de pots d'hémocultif avec des inhibiteurs d'antibiotiques (particules de carbone activées).

- Minimum 2 échantillons doivent être prélevés sur différents sites anatomiques, comme le bras droit et le bras gauche. En suspicion d'endocardite 3, des échantillons sont recommandés. Dans chaque échantillon, 2 bouteilles (une de l'aérobiose et une autre d'anaérobiose) seront incluses.

Quantité d'échantillon

La quantité d'échantillon varie en fonction de l'âge du patient, mais le rapport 1: 5 à 1:10 doit toujours être maintenu.

Chez les nouveau-nés, la quantité d'échantillon recommandée est de 1 ml de sang pour chaque bouteille. La bouteille pédiatrique est utilisée.

Dans le cas des nourrissons entre un mois et un an. La bouteille pédiatrique est utilisée.

Chez les enfants de plus de 2 ans, l'échantillon approprié est de 2,5 ml de sang par bouteille. La bouteille pédiatrique est utilisée.

De l'adolescence, il peut être augmenté à un volume de sang entre 5 et 10 ml par bouteille. La bouteille adulte est utilisée.

Enfin, au stade adulte, la quantité nécessaire est de 8 à 10 ml par bouteille. La bouteille adulte est utilisée.

Prise d'échantillon

- L'échantillon de sang peut être veineux ou artériel. Cependant, il ne prend que l'artériel uniquement lorsque l'échantillon veineux est impossible.

- Il n'est pas conseillé de prendre l'échantillon d'un cathéter veineux central à moins:

1. Il est impossible de prendre l'échantillon périphérique (veineux ou artériel).
2. Patients à risque de saignement.
3. Lorsque le médecin soupçonne la bactériémie par contamination du cathéter veineux central.
4. Lorsque la fièvre réapparaît après une cessation fiévreuse de 4 à 5 jours, que le patient soit ou non en traitement antimicrobien.

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Asepsis avant la prise d'échantillon

- Choisissez les sites d'échantillons anatomiques. Les meilleures veines de calibre (basilique ou veine céphalique) sont généralement choisies).

- Selon les Centers for Disease Control (CDC) d'Atlanta (EE.Uu.), L'opérateur doit se laver les mains avec 2% de chlorhexidine ou 10% de povidone iodisée avant la prise d'échantillon, en plus de porter des gants.

-Palper et localiser la veine à utiliser.

-Nettoyez la zone de ponction en forme de rotation, ce qui fait que les mouvements centraux à l'aide de savon chlorhexidine ou de savon antiseptique. Rincer avec une solution saline stérile.

Par la suite, appliquez une loi antiseptique et laisse. Exemple de gluconate de chlorhexidine 0,5% par minute ou de povidone iodisé 10% pendant 2 minutes. Pour ce dernier, demandez d'abord si le patient est allergique à l'iode. S'il est allergique, il peut être remplacé par 70% d'alcool.

Extraction d'échantillon

- Placez le garrot pour exacerber le flux sanguin et germer la veine.

- Ne touchez pas la zone de ponction avec votre doigt. Si cela était strictement nécessaire, le doigt doit être lavé de la même manière à la zone de ponction.

-Entrez l'injecteur ou l'aiguille du cuir chevelu dans la veine et extraire la quantité nécessaire de sang.

-Ne placez pas de coton ou de gaze sur l'aiguille lorsque vous le retirez s'il n'est pas stérile.

-Retirez le joint de sécurité des bouteilles très soigneusement et sans toucher le capuchon. Certains auteurs recommandent la désinfection du bouchon avant d'inoculer l'échantillon.

- Distribuez la quantité de sang dans les pots. Si l'échantillon est prélevé avec un injecteur d'abord, la quantité nécessaire est versée sur la bouteille anaérobie puis dans la bouteille aérobie. Si la prise est effectuée avec le cuir chevelu (papillon).

- Mélangez doucement la bouteille d'hémoculture par investissement.

- Changer les gants et répéter les étapes précédentes pour le deuxième échantillon de prélèvement.

-Si le deuxième échantillon est prélevé sur un site différent, cela peut être fait immédiatement, mais s'il est au même endroit, il faut s'attendre à 30 à 90 minutes entre un échantillon et un autre.

- L'échantillon doit être emmené au laboratoire dès que possible, si cela n'était pas possible, il doit être laissé à température ambiante jusqu'à un maximum de 18 heures.

Cultive

Une fois en laboratoire, les bouteilles sont incubées à 37 ° C dans les conditions de chaque bouteille, c'est-à-dire en aérobiose et en anaérobiose respectivement.

Selon la méthode manuelle, vous devez commencer à remplacer à 24 heures d'incubation, puis jouer interdionnement. Les réparations sont faites comme suit: Tout d'abord, le bouchon de bouteille est désinfecté et l'aiguille d'un injecteur stérile est introduite. Le liquide est extrait de la bouteille et semis dans du sang et de la gélose au chocolat.

S'il y a une croissance, un gramme est effectué, subjectif dans des milieux spécifiques, des tests biochimiques et des antibiogrammes.

Dans les méthodes automatisées, l'équipement BACT / alerte émet une alarme lorsqu'il détecte qu'une bouteille est positive. De la même manière, vous devez être reproduit dans le sang et la gélose au chocolat.

Une autre méthode qui est imposée est d'analyser la bouteille à 6 heures d'incubation par spectrométrie de masse. Cette méthode a contribué à augmenter la sensibilité et la vitesse du diagnostic.

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Résultats

Alors que la bouteille d'hémoculture est négative. Le rapport indique qu'il est négatif aux heures d'incubation. Par exemple, si cela devient négatif jusqu'au quatrième jour, il sera signalé comme suit:

Résultat préliminaire: culture négative à 96 heures d'incubation.

Note: L'étude continue de terminer 240 heures.

Si le positif est positivement informé du médecin traitant et qu'un rapport est envoyé avec au moins le gramme de la colonie. Exemple:

Résultat préliminaire: En culture positive à 48 heures d'incubation, le gramme est observé à Gram négatif et à des bacilles d'oxydase négatifs. Le test d'identification et de sensibilité est en cours.

Ces données guident le médecin traitant pour initier une thérapie empirique vers le micro-organisme possible, en attendant le résultat final du laboratoire.

Lorsque vous terminez l'étude bactériologique, c'est-à-dire que le micro-organisme a été identifié et l'antibiogramme est eu, le rapport final doit être envoyé dès que possible.

Des soins particuliers doivent être pris si le micro-organisme recherché est Neisseria gonorrhoeae soit Neisseria Meningitidis, Étant donné que ces bactéries sont inhibées en présence de concentrations élevées de polyanétolsulfonate de sodium (SODIUM Polynétosulfonate SPS).

C'est pourquoi, ce composé ne devrait pas dépasser 0.025% dans les bouteilles d'hémoculture.

En revanche, si l'échantillon de l'hémoculture est prélevé pour la première fois dans les tubes de vidange, ces tubes ont des concentrations de SPS toxiques pour les méningocoques et les gonocoques afin que le sang doit être transféré avant 1 heure vers le système de culture dans le bouillon.

Comment savoir si une hémoculture est positive ou contamination

Une hémoculture est considérée comme contaminée lorsqu'il y a une croissance dans une bouteille d'hémoculture prise. Et la suspicion de contamination augmente si le micro-organisme isolé est un microbiote en cuir ordinaire: Exemple: Staphylococcus coagulase négatif, Propionibacterium spp, entre autres.

Cependant, chez les patients immunodéprimés, aucun micro-organisme ne doit être méprisé, mais dans ce cas, le micro-organisme devrait apparaître dans plusieurs échantillons.

D'un autre côté, si la sensibilité aux antibiotiques du même micro-organisme isolé dans deux coups d'échantillonnage différents coïncide, l'infection est réelle.

Une autre caractéristique est la charge bactérienne, car les hémocultures contaminées se développent tard, tandis que les infections réelles chez les patients non apparentés sont généralement positifs à 14 heures d'incubation lorsque le micro-organisme n'est pas ennuyeux.

D'un autre côté, chez les patients traités avec des antimicrobiens, le micro-organisme impliqué peut prendre une croissance car la charge est très faible.

L'apparition de plus d'un micro-organisme peut suggérer une pollution, mais si le même résultat est répété dans plusieurs plans de sites différents, alors il est réel.

Les références

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