Caractéristiques, types, techniques et histologie du frottis sanguin

Il Frottis de sang Il s'agit d'un sang périphérique étendu qui sert à analyser les composants présents dans la circulation sanguine. L'observation d'un sang de sang.

Le sang rubb.

Préparation du sang de sang. Source: sang dans un verre de laboratoire. Domainpictures de pub.filet

Dans ce document, des anomalies peuvent être détectées dans le nombre de cellules, telles que: leucocytose ou la leucopénie, la lymphocytose ou la lymphopénie, la neutrophilie ou la neutropénie, la thrombocytose ou les thrombocytopénies et l'éosinophilie. Des anomalies peuvent également être observées sous la forme et la taille des cellules.

De plus, il est possible de détecter divers types d'anémies, de leucémie et de parasites bactériens ou sanguins.

Pour cela, il existe différents types de frottis qui sont effectués en fonction de l'objectif de l'étude. Il y a de minces frottements de goutte et un frottis de goutte épais. Ces frottis diffèrent dans la technique d'exécution et dans le but de l'étude.

Des gouttelettes fines sont utilisées comme complément pour compléter l'hématologie. Cela fournit les données de formule leucocytaire, en plus de l'analyse de la forme et de la morphologie des trois séries cellulaires qui composent la série Blood: Red, les séries blanches et les plaquettes. Bien qu'ils servent également de complément à l'étude de la chute épaisse.

Une chute épaisse est utilisée pour le diagnostic des maladies causées par des hémoparasites, tels que le paludisme ou le paludisme, la toxoplasmose, la leishmaniose, la maladie de Pyra, la babésiose et la microfililarasis.

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Caractéristiques d'un frottis sanguin

Un bon frottement sanguin doit répondre à certaines caractéristiques. Parmi eux, ils peuvent être mentionnés:

-L'échantillon doit répondre aux exigences de qualité minimale pour être représentative.

-La prise d'échantillons doit être bien exécutée.

-Exécution en temps opportun du frottis.

-En cas de sang veineux, utilisez un anticoagulant qui ne déforme pas les cellules et mélanger le tube avant de se frotter.

-Si cela se fait avec du sang capillaire, jetez la première goutte.

-Le étendu doit être homogène. Cela garantit que les cellules sont réparties uniformément et qu'une bonne analyse des cellules sanguines peut être effectuée, en termes de forme et de nombre.

-Les côtés du frottis doivent être lisses du début à la fin.

-Le frottis doit respecter une marge de 1 à 2 mm sur les côtés de la diapositive.

-La couche étendue doit diminuer progressivement son épaisseur du début à la fin (frottis fin par la méthode de diapositive).

-Doit être correctement étiqueté pour éviter l'échantillonnage de la confusion.

-Définir et teindre correctement pour l'observation claire des éléments sanguins.

-Laissez le frottis sécher avant de monter la préparation du microscope. Le placement de l'huile d'immersion sur un rubb humide.

Types de frottis de sang

Le frottis de sang périphérique peut être classé comme un frottement de goutte mince et un frottis de chute épais. Une couche fine est utilisée pour l'étude de la formule des leucocytes et l'observation morphologique des cellules sanguines. Les bactéries extracellulaires telles que les accidents vasculaires cérébraux et les hémoparasites, tels que Plasmodium, entre autres, peuvent également être vus, entre autres.

Dans la chute fine, vous pouvez identifier les espèces du parasite, par conséquent, c'est une technique plus spécifique que la chute épaisse, mais la chute épaisse est plus sensible, car c'est une technique de concentration utilisée pour la recherche exhaustive d'hémoparasites extracellulaires.

Il existe deux types de frottis fin: ceux qui sont fabriqués en feuilles de diapositives et celles qui sont faites en couvertures. Ceux des gouttes épaisses sont effectuées sur la diapositive.

Techniques d'échantillon de sang

Les frottis de sang peuvent être fabriqués à partir d'une ponction capillaire ou d'un échantillon veineux avec anticoagulant. Si cela fait du sang avec un anticoagulant, vous pouvez préparer l'odeur jusqu'à 2 heures après avoir prélevé l'échantillon.

La précaution de l'utilisation d'anticoagulants qui ne déforment pas les cellules sanguines doivent être prises. La meilleure option est Edta. Au contraire, l'utilisation d'anticoagulants tels que le citrate trisodique doit être évité.

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Si l'échantillon est prélevé par ponction capillaire, l'extension de l'odeur doit être effectuée immédiatement, avant que le sang ne soit coagulé.

La première goutte doit être jetée. C'est la technique la plus recommandée pour l'observation de la morphologie cellulaire, car le sang n'a pas d'additif.

Pour l'observation des hémoparasites, des solari et des collaborateurs conclus dans leurs travaux de recherche que les deux techniques (veineuse et capillaire) sont tout aussi efficaces.

Types d'échantillons de sang: A. Crevaison capillaire. B. Crevaison veineuse. Source: A. Flickr.peigne. Pxhere.com

Techniques pour l'élaboration du frottis sanguin

Le sang rubb. Il est également possible grâce à l'équipement automatisé.

-Frotter dans les diapositives

C'est la technique préférée de la plupart des laboratoires pour leur manipulation facile.

Avec une pipette Pasteur, une goutte de sang n'est pas très épaisse, ni trop fin, au centre de l'une des extrémités d'une feuille de diapositives propre.

À l'aide d'une autre diapositive avec une extrémité givrée, l'odeur est faite. Le toboggan grosé est placé perpendiculairement à l'extrémité opposée de l'endroit où se trouve la goutte.

Il se penche pour former un angle entre 30 et 45 ° et glisse vers la goutte; Lorsque vous le touchez, il se dilate linéairement sur le bord de la diapositive givrée et avec un mouvement constant et défini, la feuille est retournée; Avant d'atteindre la fin, la diapositive monte.

De cette façon, une couche homogène est étendue à la surface du porte-récepteur.

Le frottis est autorisé à sécher. Ensuite, il est fixe et coloré avec la coloration de préférence. Il est autorisé à sécher avant d'observer le microscope. Une goutte d'huile est placée sur la face étendue et observée au microscope optique.

Tracher du sang dans le glissement. Image supérieure: étalé sans colorant. Image inférieure: frottis teint. Source: Coinmac [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org / licences / by-sa / 3.0)]

Parties du frottis fabriqué sur la diapositive

Dans ce type de frottis, trois zones définies peuvent être distinguées: la tête, le corps et la queue. La tête correspond à la zone où le frottis commence, est la zone la plus épaisse et n'est pas bon à observer.

Le corps est la partie centrale ou intermédiaire du rubb.

La queue correspond à la partie finale du frottis; Ici, la distribution n'est plus uniforme et a tendance à perdre la morphologie des érythrocytes.

Contrôle de la qualité dans la technique du titulaire

Dans cette technique, il joue un rôle fondamental:

-Nettoyage et dégraissement de la diapositive: garantit le bon glissement de l'échantillon.

-La taille de la goutte: avec de très grandes gouttes, une plus grande chute sera obtenue, avec une très petite chute, la prolongation sera plus courte et plus fine.

-La vitesse appliquée à l'extension: à une vitesse inférieure, l'odeur sera plus fine, à une vitesse plus élevée, ce sera plus épais.

-L'angle d'exécution: à un angle inférieur plus fin sera l'odeur, à l'angle le plus élevé, il sera plus épais.

-Frotter les couvertures

Il n'est pas largement utilisé pour être des cumbers.

Une goutte pas très épaisse est placée, ou très fine, au centre d'une couverture. Immédiatement, une autre couverture est placée au-dessus de cela de telle manière que les pointes des deux couvertures hors stand, formant une étoile.

La goutte se propagera spontanément à la surface des deux couvertures. Lorsque l'extension est terminée, chaque laminille se glisse sur le côté opposé les uns des autres (l'un à droite et l'autre à gauche).

La technique fournit deux frottis au lieu d'un.

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Ils sont placés pour sécher avec le visage de la fois vers le haut. Une fois sec, il est fixé et coloré avec la technique de préférence. Il est autorisé à sécher. Une goutte d'huile d'immersion est placée dans une feuille de diapositives, le frottement est placé avec la face du bas étendu et observée au microscope.

Contrôle de la qualité dans la technique de CupBject

Il est important d'obtenir un bon frottis pour cette technique:

-Nettoyage des couvertures (aide au bon glissement de l'échantillon).

-La taille de la goutte (influence l'épaisseur de l'allée).

-La vitesse à laquelle les couvertures sont séparées (influence l'homogénéité des étendues).

-Avec équipement automatisé

Ils peuvent être faits à travers l'une de ces équipes: Spinner et Autoslide.

Le spinner est constitué de placer une diapositive avec une goutte de sang sur un plat de centrifugation spécial. L'échantillon est centrifugé à grande vitesse; De cette façon, un homogène étendu et une amende de l'échantillon est formé. Son inconvénient a la possibilité de montrer une hémolyse.

Autoslide est un instrument qui effectue mécaniquement les mouvements de l'exécution du frottis dans les diapositives. Vous pouvez également réparer et teindre le frottis. Il peut même s'adapter à certains compteurs hématologiques automatiques.

Technique de frottis d'épaisseur

Pour la recherche d'hémoparasites, il est recommandé de faire deux frottis: un avec une chute fine et une avec une chute épaisse.

Faire une crevaison capillaire, nettoyer la première goutte. Placez une belle goutte sur une diapositive et effectuez l'odeur comme expliqué précédemment. Pour la chute épaisse, placez une grande goutte sur une autre diapositive et s'étendez sous la forme d'un carré de 1,55 mm. Laissez les deux maculations.

Coloration de la coloration

Pour ceux des gouttelettes fines, vous pouvez utiliser la coloration de Giemsa ou Wright, entre autres. Pour la chute épaisse, la coloration de giemsa ou de may-grunwald giemsa est recommandée.

Talage Giemsa

Le frottis est fixé pendant 3 minutes avec du méthanol, il est drainé et laissé sécher à nouveau. Ensuite, le frottis est recouvert de coloration de Giemsa pendant 10 à 15 minutes. Laver à l'eau distillée et laisser sécher. Pour observer une goutte d'huile d'immersion au microscope.

Tacherie de Wright

Le frottis est couvert de la teinture de Wright pendant 5 minutes. Jeter et placer la solution tampon à un pH de 6, 8 pendant 6 minutes. Faire sauter la préparation à l'homogénéisation. Laver à l'eau distillée et laisser sécher. Observer le microscope.

Types de frottis défectueux

Il se produit dans les apprentis dans la technique de la chute fine avec des diapositives.

Forcer des zones de différentes épaisseurs (fine et épaisse entrecoupée)

C'est parce que le mouvement exécuté n'était pas constant pendant celui étendu, faisant des arrêts et réinitialise.

Frottis avec très court étendu

Ils ont 2 causes: l'une est due au fait que la diapositive givrée a été soulevée avant d'atteindre l'autre extrémité de la feuille. Dans ce cas, il est extrêmement épais et court.

D'un autre côté, si le frottis est court mais mince, c'est parce que la taille de la goutte était très petite.

Ruban

Il présente plusieurs causes: l'une est que la chanson givrée est défectueuse, que la pression exercée sur la diapositive de réception est augmentée au moment de l'achèvement de la chant étendue ou que la chanson givrée de la diapositive est dépensée.

Ruban

Ils sont dus à l'utilisation d'un frottis gras (mal lavé et dégraissant).

Tradu très épais ou très fin

Les gouttes trop grandes génèrent une odeur très épaisse du début à la fin et de très petites gouttes très fins.

Histologie

Dans un frottis de sang, vous pouvez voir les cellules sanguines. Parmi eux se trouvent:

-Érythrocytes ou globules rouges

Sang humain, érythrocytes ou globules rouges et deux globules blancs. Pris et édité à partir de: viascos [cc by-sa 4.0 (https: // CreativeCommons.Org / licences / by-sa / 4.0)].Votre observation est de la plus haute importance. À ce niveau, les problèmes d'anémies, de talasémies, de maladie de la moelle osseuse, etc. peuvent être détectés.

Le nombre d'érythrocytes ou de globules rouges est d'environ 5 x 10⁶ mm3 dans l'homme et 4,5 x 10⁶ Chez les femmes. Les globules rouges sont en forme de disques bicontiques, avec une pâleur centrale physiologique. Ils peuvent être observés séparément (normaux) ou formant l'empilement dans les rouleaux (anormaux).

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In the smears, the presence of poiquilocytosis (erythrocytes of various forms), anisocytosis (erythrocytes of various sizes), anisopoiquilocytosis (various shapes and sizes), anisocry (different colors), erythroblasts (immature erythrocytes), microcytosis (smaller erythrocytes (smaller erythrocytes )) et les macrocytes (érythrocytes plus grands).

Lorsqu'ils ont une carence en quantité d'hémoglobine et de pâleur centrale, cela augmente, il est dit qu'il y a une hypocry. Lorsqu'une série rouge normale est observée, cela sera signalé comme normocytaire et normochromique.

-Blanc ou leucocytes

globules blancs

Le montant normal varie de 5.000 à 10.000 mm³. Ils sont modifiés dans les processus infectieux, dans les allergies et dans la leucémie. Dans le frottis sanguin, plusieurs types expliqués ci-dessous peuvent être distingués ci-dessous.

Neutrophiles segmentés

Ils représentent 55 à 65% du total des leucocytes. Ils mesurent entre 10 et 15 μm. Ils ont un noyau segmenté ou lobé qui adopte diverses morphologies, il est donc appelé polymorphonucléaire.

Ils ont des granules neutrophiles abondants dans leur cytoplasme et certains azurophiles. Ils augmentent des infections bactériennes (neutrophilie), diminution des infections virales (neutropénie).

Les anomalies morphologiques telles que la pléocariocytose (noyau hyper-segment), la chute (cellules immatures) ou les macropolicitos (ovale et grande taille) peuvent être observées.

Autres modifications:

-Granulations toxiques

-Pseudo neutrophiles de Pelger (le noyau ne présente pas de lobulations ou est bilobulé).

-Döhle Bodies: Inclusions cytoplasmiques bleu foncé.

-Augmentation de la basophilie cytoplasmique.

-Vacuolas intracitoplasmiques.

-Picnose cellulaire (perte de ponts internationaux).

Éosinophiles segmentés

Ils représentent 1 à 3% du total des globules blancs. Ils mesurent 9-10 μm. Ils se caractérisent par la présence de granules cytoplasmiques acidophiles abondants et de rares azurophiles. Son noyau a deux lobulations. Son nombre augmente des allergies et des maladies d'origine parasite.

Basophiles segmentés

Ils sont extrêmement rares, ils représentent 0-1% des leucocytes. Ils mesurent 10-12 μm. Le noyau est généralement des bords irréguliers et peut être bilobé, mais il n'est pas observé en raison de la grande quantité de basophiles épais dans son cytoplasme. On peut observer très rarement la basophilie.

Lymphocytes

Ce sont de petites cellules avec du cytoplasme basophile, avec un noyau, bien défini, rond, avec de la chromatine condensée. Le noyau couvre presque toute la cellule. Ils représentent 26 à 40% des leucocytes sanguins. Ils augmentent des infections virales (lymphocytose). Des lymphocytes réactifs peuvent être observés.

Monocytes

Plus grandes cellules que les lymphocytes, avec un plus grand cytoplasme et un noyau de cromatine ovale plus laxiste. Ils mesurent 9-12 μm. Le cytoplasme est abondant et est généralement vu en bleu grisâtre pâle avec les techniques de coloration habituelles. Parmi les modifications, des monocytes vacuolés et de monocytose peuvent être observés.

-Plaquettes

Ils mesurent entre 1.5-3 μm. Sa forme est ronde ou ovale. La valeur normale varie de 150.000 à 350.000 plaquettes / mm3. Ils peuvent diminuer dans certaines infections virales. Ils n'ont pas de noyau et de couleur violet. Des anomalies peuvent être observées dans cette série, telles que la macroplaque ou les micropollages, la thrombocytose ou la thrombocytopénie et les fragments de plaquettes.

Éléments pathologiques

Parasites hématiques

Dans le frottis sanguin, des hémoparasites peuvent être observés, comme l'agent causal du paludisme (parasites du genre Plasmodium). Par conséquent, il est important que le frottis soit analysé manuellement, car les équipes automatisées passent inaperçues.

Bactéries

Dans les pathologies telles que la fièvre récurrente ou dans la maladie de Lyme, il est possible d'observer votre agent causal. Dans ce cas, cela correspond aux spirochètes Borrelia récurrenti Pourtant le Borrelia Burgdorferi Dans le frottis de sang.

Cellules immatures

Des cas graves sont observés dans la leucémie, dans les réactions leucémoïdes et dans la réaction leucoeritroblastique, entre autres. Dans les infections bactériennes, il peut y avoir de légères déviations à gauche (présence de cayados). Aussi dans certaines anémies, vous pouvez observer les érythroblastes.

Les références

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