Agar Vogel-Johnson What Is, Foundation, Préparation, utilise

Il Gélose Vogel-Johnson Il s'agit d'un moyen de culture solide, sélectif et différentielle, spécialement formulé pour l'isolement de Staphylococcus aureus. Ce médium a été créé par Vogel et Johnson en 1960 à partir de la modification de la gélose du glycina Telurito formulée en 1955 par Zebovitz, Evans et Niven.

La modification consistait à augmenter la concentration du manitol présent dans l'environnement et dans l'incorporation d'un indicateur de pH. La formule actuelle est composée de tripteína, d'extrait de levure, de mannitol, de phosphate de dipotassium, de chlorure de lithium, de glycine, de rouge phénol, d'agar, 1%.

Il convient de noter qu'il existe d'autres médias qui, comme l'agar Vogel-Johnson sont sélectifs pour l'isolement de S. aureus, comme l'agar du mannitol salé et la gélose de Baird Parker. En ce sens, on pourrait dire que la fondation du Vogel - Johnson est d'accord est un mélange entre l'agar du mannitol salé et l'agar Baird Parker.

Dans le premier les colonies de S. aureus Ils se distinguent par le fermentol. D'un autre côté, dans la seconde le S. aureus Il se caractérise par la réduction de Teluro à Teluro et la formation de colonies grises en noir. Les deux propriétés sont observées dans la gélose Vogel-Johnson.

Ce médium, comme ses homologues, est utile pour la détection de Staphylococcus aureus Dans les échantillons d'aliments, les contrôles de santé des produits industriels et dans des échantillons cliniques.

Base

Contribution des nutriments

Le milieu Vogel - Johnson contient du triptein et de l'extrait de levure; Les deux substances fournissent des acides aminés à longue chaîne qui servent de sources de carbone et d'azote nécessaires à la croissance bactérienne. Les bactéries capables de grandir dans ce milieu prendront les nutriments de ces substances.

Pouvoir sélectif

L'agar Vogel - Johnson est capable d'inhiber la croissance des bactéries gram négatives et même des grammes positifs, favorisant le développement de staphylocoques de coagulases positifs. Les substances inhibiteurs sont le tellurite de potassium, le chlorure de lithium et la glycine.

Puissance différentielle

Les substances qui font ce milieu différentiel sont le mannitol et le potassium tellurite. Le Manitol est un glucides et lorsque des acides fermentés sont produits qui font le milieu du rouge au jaune, ce qui se produit grâce à la présence de l'indicateur de pH de pH rouge.

Tandis que la télélurite incolore lorsqu'elle est réduite en teluro libre métallique, prend une couleur gris foncé.

Il Staphylococcus aureus fermente le mannitol et réduit le teluro à Téluro. C'est pourquoi les colonies typiques de S. aureus Dans ce milieu, ils sont gris ou noirs entourés d'un milieu jaune.

Les bactéries qui poussent dans ce milieu et ne réduisent pas la télélurite ou ne ferment pas le mannitol, formeront des colonies transparentes entourées d'un milieu rouge, encore plus intense que la couleur d'origine, en raison de l'alcalinisation du milieu par l'utilisation de peptones.

D'un autre côté, les bactéries qui réduisent la télélurite mais pas fermente le Manitol se développera sous forme de colonies grises ou noires entourées d'un milieu rouge intense.

Si le milieu préparé sans l'ajout de la tellurite de potassium, les colonies de S. aureus Ils se développeraient sous forme de colonies jaunes, entourées d'un milieu jaune, comme cela se produit dans la gélose du mannitol salé.

Équilibre osmotique et agent de solidificateur

Le phosphate de dipotassium maintient l'équilibre osmotique du milieu et ajuste le pH à la neutralité 7.2. Tandis que l'agar donne une solide cohérence au milieu de culture.

préparation

1% de solution de télélurite de potassium P / V

Cette solution n'est pas incluse dans l'environnement déshydraté, car il ne peut pas être stérilisé dans l'autoclave. Pour cette raison, il est préparé et ajouté au support déjà stérilisé.

Certaines maisons commerciales vendent la solution de télélurite de potassium à 1% prête à l'emploi. Si vous souhaitez vous préparer en laboratoire, procédez comme suit:

Peser 1.0 GR de Tellurite de potassium et mesurez 100 ml d'eau distillée. Dissoudre la télélurite de potassium dans une partie de l'eau, puis complétez la quantité d'eau jusqu'à ce qu'elle atteigne 100 ml. Stériliser la solution par la méthode de filtration.

Base d'agar Vogel-Johnson

Peser 60 gr du milieu déshydraté et dissoudre dans 1 litre d'eau distillée. Le mélange est chauffé à bouillir pour aider la solution complète. Pendant le processus de dissolution, le milieu est agité fréquemment.

Stériliser en autoclave 15 livres de pression et 121 ° C pendant 15 minutes. Retirer de l'autoclave et laisser reposer jusqu'à ce que le milieu atteigne une température approximative de 45 à 50 ° C. Ajouter 20 ml de la solution de télélurite de potassium précédemment préparée à 1%.

Mélanger et verser sur des assiettes stériles de Pétri. Laisser solidifier et commander dans une plaque inversée.

Le pH final du milieu préparé doit être à 7,2 ± 0,2.

Avant de semer un échantillon, vous devez attendre que la plaque prenne la température de l'environnement.

La couleur du milieu préparé est rouge.

Utiliser

Bien qu'il puisse être utilisé pour l'isolement de S. aureus Dans tout type d'échantillons, il est principalement utilisé pour l'analyse microbiologique des produits pharmaceutiques, des cosmétiques et des aliments.

Il est recommandé que l'inoculum soit dense. Le semis peut être fait en frappant avec une poignée en platine ou par surface avec une spatule Drigalski.

Les plaques sont incubées à 35-37 ° C pendant 24 à 48 heures en aérobiose.

Contrôle de qualité

Pour effectuer un contrôle de qualité à l'environnement Vogel-Johnson, vous pouvez utiliser les contrôles des souches suivantes:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 O Proteus mirabilis ATCC 43071.

Le résultat attendu est le suivant: pour les souches de S. aureus croissance satisfaisante avec des colonies noires entourées de milieu jaune. Pour S. épidermidis Croissance régulière avec des colonies translucides ou noires entourées de milieu rouge.

Aussi pour ET. coli Il est prévu qu'il y aura une inhibition totale et pour Proteus mirabilis inhibition partielle ou totale; S'il pousse, il le fera à peine et les colonies seront noires entourées de demi-couleur rouge.

Les références

1. Laboratoires BD. VJ (Vogel et Johnson Agar). Disponible sur: BD.com
2. Laboratoires britanniques. Gélose Vogel-Johnson. Disponible sur: Britanialab.com