Tachage simple

Qu'est-ce que la simple coloration?

La Tachage simple Il s'agit d'une procédure de coloration rapide et simple dans laquelle un seul colorant est utilisé, il est donc appelé simple. Il est principalement utilisé pour déterminer la morphologie et l'organisation des cellules présentes dans un échantillon.

Naturellement, les cellules n'ont pas de couleur, il est donc nécessaire de les rendre visibles d'une manière ou d'une autre lorsqu'elles sont observées au microscope.

Il est important de souligner que les colorants utilisés dans la coloration simple doivent être basiques avec une charge positive (cationique), afin qu'ils puissent rejoindre spontanément la paroi et le cytoplasme cellulaire.

Ces structures cellulaires sont chargées négativement. Par conséquent, le colorant, chargé positivement, est attiré par les cellules et les rejoint spontanément. Ainsi, toutes les cellules présentes dans un échantillon sont rapidement colorées.

Couleurs de coloration en simple teint

Il existe plusieurs colorants de base qui peuvent être utilisés dans le laboratoire de microbiologie. Les plus utilisés sont:

• Bleu de méthylène.
• Violet cristallisé.
• Malachite vert.
• Fuchsin de base.

Tous ces colorants fonctionnent bien dans les bactéries car ils ont des ions de couleur (chromophores) avec une charge positive (cationique).

Les temps de coloration pour la plupart des colorants sont relativement courts. Généralement, ils varient de 30 secondes à 2 minutes, selon l'affinité du colorant.

Il est important de garder à l'esprit qu'avant la teinture d'un échantillon par une simple coloration, il doit être étendu et fixé à la feuille de verre (diapositive). L'échantillon étendu et fixe est appelé frottis.

Procédure

Étape 1

Placez la diapositive sur une étagère de coloration et appliquez le colorant souhaité. Laissez la loi sur le temps correspondant.

Normalement, une simple coloration prend quelques secondes ou quelques minutes, selon la couleur de coloration.

Observation

Dans cette étape, il est important de ne pas dépasser le temps recommandé pour le colorant utilisé, car des cristaux pourraient être formés dans la feuille, produisant ce que l'on appelle des "artefacts", qui déforment la morphologie des cellules.

Étape 2

Lavez soigneusement le frottis de la lame avec de l'eau distillée dans une bouteille, ou avec de l'eau du robinet qui coule lentement, jusqu'à ce que le ruissellement devienne transparent. En général, cela prend 5 à 10 secondes.

Observation

N'appliquez pas le courant d'eau directement sur l'odeur, pour éviter la force des mêmes dommages.

S'il n'y a pas d'eau distillée, l'eau du robinet peut être utilisée sans problème, car elle n'affectera pas le résultat de la coloration.

Étape 3

Sécher la glissière avec des serviettes en papier absorbantes dans un sens et sans frotter. Assurez-vous que la partie inférieure de la diapositive est propre.

Étape 4

Observer le frottis teint au microscope. Commencez par les objectifs les plus éloignés pour localiser correctement la zone que vous souhaitez observer plus en détail. Modifiez la cible pour se rapprocher et plus vers l'échantillon.

Observation

Pour l'utilisation de l'objectif avec la plus grande augmentation (normalement 100x), l'huile d'immersion doit être utilisée, car cela aide la lumière à mieux pénétrer et que l'image semble plus claire. Il n'est pas nécessaire d'utiliser une couverture.

Étape 5

Enfin, jetez tous les échantillons dans un conteneur approprié qui est dûment étiqueté comme "risque biologique".

Applications

• Observation de la morphologie cellulaire.
• Observation d'échantillons dans les laboratoires chimiques, pour déterminer la présence de bactéries, de virus, etc.
• Identifier les agents infectieux et diagnostiquer correctement.
• Comme un outil indispensable en microbiologie.
• Savoir si une bactérie a une capsule ou non, et savoir à quel type il appartient.

Les références

1. Applications microbiologiques: Manuel de laboratoire en microbiologie générale. Les sociétés McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Une introduction à la biotechnologie pratique. Pare-feu médiatique.