Reactif de Benedict pour ce qui est l'utilisation, les composants, la préparation

Il Réactif de Benoît Il s'agit d'une solution de cuivre bleuâtre qui est utilisée pour détecter la présence de sucres réducteurs: aldéhydes, états alpha-hydroxy et hémicète. Il a été développé par Stanley R. Benoît (1884-1936).

Les sucres alpha-hydroxy sont caractérisés par la possession d'un groupe hydroxyle dans l'adjacence de Cetona. Pendant ce temps, un hémicetal est un composé qui résulte de l'ajout d'un alcool à un aldéhyde ou à cetona. Le réactif de Benedict réagit sans discrimination avec tous ces sucres réducteurs.

Les colorations des tubes à essai après avoir ajouté le réactif Benedict vous permet de savoir semi-qualitativement combien de sucres réducteurs sont dissous. Source: Thebiologyprimer [CC0]

La méthode de Benedict est basée sur la réduction des sucres sur Cu²⁺, coloration bleue, qui la transforme en cu⁺. Le CU⁺ Forme un précipité rouge à roue rouge. Cependant, selon la concentration de sucres, un spectre de couleurs apparaît (image supérieure).

Notez que si le réactif de Benedict est ajouté à un tube d'essai de sucre réducteur (0%), il ne subit aucun changement de coloration bleuâtre. Ainsi, lorsque la concentration est supérieure à 4%, le tube à essai est teint à partir d'une couleur brune.

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Histoire

Le réactif a été créé par le chimiste américain Stanley Rossiter Benedict en 1909, qui a publié son article scientifique Un réactif pour la détection de la réduction des sucres, Dans J Magazine. Biol. Chem.

De plus, Lewis et Benedict (1915) ont publié une méthode pour déterminer les sucres de réduction du sang, en utilisant comme indicateur du Picratus; Mais il a cessé d'être utilisé en raison de son manque de spécificité.

Le réactif de Benedict est très similaire à celle de Fehling. Ils diffèrent dans lesquels Benoît utilise le sel de carbonate de sodium et de sodium; Tandis que Fehling utilise l'ion d'hydroxyde de tartato et de sodium.

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Le test de Benedict est qualitatif, c'est-à-dire qu'il détecte uniquement la présence de réduction des sucres. Cependant, le réactif de Benedict peut être quantitatif s'il a un tiocyanato de potassium en solution, qui forme un précipité blanc de thiocyanate de cuivre qui peut être apprécié en utilisant des motifs de glucose.

Qu'est-ce que le réactif de Benedict?

Détection de glucose d'urine

Le réactif de Benedict est toujours utilisé pour détecter la présence de glucose dans l'urine et est une indication de la maladie du diabète du patient, dont l'urine est soumise au test ou au test de Benoît. Bien qu'il ne puisse être exclu que la glucosurie a une origine différente.

Par exemple, il existe une glucosurie augmentée dans des conditions telles que: la grossesse, la glycosurie rénale primaire, l'acidose tubulaire rénale, le syndrome de Fanconi primaire ou secondaire, l'hyperaldostéronisme et la pancréatite aiguë ou le cancer du pancréas.

Le réactif de Benedict est de couleur bleue en raison de la présence de Cu²⁺, qui est réduit à Cu⁺ par l'action de réduire les sucres; Dans ce cas, le glucose, formant un précipité d'oxyde frais (i) en brique.

Coloration de la solution

La coloration et la formation du précipité dans le test Benoît appliqué à l'urine varie en fonction de la concentration du sucre réducteur. Si la concentration en glucose d'urine est inférieure à 500 mg / dl, la solution acquiert une coloration verte et il n'y a pas de formation de précipité.

La concentration de glucose d'urine de 500 - 1.000 mg / dL provient un précipité vert dans le test de Benoît. À une concentration supérieure à 1.000 à 1.500 mg / dl, provoque la formation d'un précipité jaune.

Si la concentration en glucose est 1.500 - 2.000 mg / dl, la formation d'un précipité orange sera visible. Enfin, une concentration en glucose d'urine est supérieure à 2.000 mg / dL, provoquera la formation d'un précipité rouge en brique.

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Cela indique que le test de Benoît a un caractère semi -antitatif et que le résultat est rapporté en recourant à des croix. Par exemple, une croix (+) correspond à la formation d'un précipité vert; Et à la formation d'un précipité rouge en brique, quatre croix (++++) correspondent à.

Détection de plusieurs monosaccharides et disaccharides

Le réactif de Benedict détecte la présence de réduction des sucres qui ont un groupe fonctionnel libre ou un groupe fonctionnel libre de Cetona, dans le cadre de sa structure moléculaire. C'est le cas du glucose, du galactose, de la main et du fructose (monosaccharides), ainsi que du lactose et du maltose (disaccharides).

Le saccharose et l'amidon ne réagissent pas avec le réactif de Benedict pour avoir des groupes de réduction gratuits. De plus, il existe des composés qui interfèrent avec le test de Benoît dans l'urine, donnant une fausse positivité; C'est le cas du salicylate, de la pénicilline, de la streptomycine, de la lévodop.

Il existe des produits chimiques présents dans l'urine qui peuvent réduire la réaction de Benoît; Par exemple: créatinine, urate et acide ascorbique.

Composants

Les composants réactifs de Benoît sont les suivants: sulfate de cuivre pentahydraté, carbonate de sodium, citrate trisodique et eau distillée.

Sulfate de cuivre pentahydrate, cuso₄· 5h₂Ou, contient le cu²⁺: C'est le composé qui donne la couleur bleue au réactif Benoît. Les sucres réducteurs agissent sur le CU²⁺, produisant sa réduction à Cu⁺ et la formation d'un précipité à l'oxyde cuprume (Cu₂O) Brick Red.

Le carbonate de sodium génère un milieu alcalin, nécessaire pour que la réduction du cuivre se produise. Le carbonate de sodium réagit avec l'eau, générant du bicarbonate de sodium et de l'ion hydroxyle, OH^-, Responsable de l'alcalinité de l'environnement nécessaire pour que le processus réducteur se produise.

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Le citrate de sodium forme un complexe avec du cuivre (II) qui l'empêche de vivre pendant le stockage une réduction à Cu (i).

Utiliser la procédure

5 ml de réactif de Benoît sont placés dans un tube à essai de 20 x 160 mm et 8 gouttes d'urine sont ajoutées. Le tube à essai est légèrement agité et placé dans un récipient avec de l'eau bouillante pendant 5 à 10 minutes.

Après ce temps, le tube du bain d'eau chaude est retiré et sa surface avec de l'eau courante se refroidit à la fin.

Réaction de test de Benoît

La réduction de Cu (ii) pendant le test de bénédictination peut être schématique comme suit:

Rcho +2 cu²⁺ (en complexe) +5 oh^- => Rcoo^-  +  Cu₂O +3 H₂SOIT

Rcho = aldéhyde; Rcoo^- = (ion carboxylate); Cu₂O = oxyde de cuprous, un précipité rouge en brique.

Préparation du réactif de Benedict

173 grammes de citro-sodium. Si des restes de substances non dissolues sont observées, la solution doit être filtrée.

D'un autre côté, 17,3 grammes de pentahydrate de sulfate de cuprique dans 100 ml d'eau distillée se dissolvent.

Par la suite, les deux solutions aqueuses sont doucement mixtes et une agitation permanente se poursuit, se terminant à 1.000 ml avec de l'eau distillée.

Les références

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4. Équipe éditoriale. (9 janvier 2019). Test de Benoît: principe, préparation, procédure et interprétation des réactifs. Récupéré de: LaboratoryInfo.com
5. Docteur. Whitson. (s.F.). Réactif de Benedict: A pour la réduction des sucres. Récupéré de: NKU.Édu