Quels sont le lentivirus?
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- Lucas Schneider
Les Lentivirus, du latin lenti Ce qui signifie lent, ils sont un virus qui nécessite longtemps, entre mois et années, de l'infection initiale à l'apparition de la maladie. Ces virus appartiennent au genre Lentivirus et rétrovirus (famille Rétroviridae), qui ont un génome d'ARN qui est transcrit à l'ADN par transcriptase inverse (TR).
De nature, le lentivirus est présent chez les primates, les ongulés et les félines. Par exemple, chez les primates, il existe deux lignées phylogénétiquement liées: les virus de l'immunodéficience de l'apésabilité (SIV) et les virus de l'immunodéficience humaine (VIH). Les deux sont les agents provoquant un syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA).
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Le lentivecteur, obtenu auprès du lentivirus, a été largement utilisé pour la recherche fondamentale en biologie, génomique fonctionnelle et thérapie des gènes.
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Étapes du cycle de vie du rétrovirus
Le cycle de vie de tous les rétrovirus commence par l'union de l'organisme à un récepteur spécifique à la surface de la cellule, suivi de l'internalisation du virus par endocytose.
Le cycle se poursuit avec l'élimination de la couverture du virus et la formation d'un complexe de nucléoprotéine virale (VNC), qui se compose d'un génome viral associé aux protéines virales et cellulaires. La composition du complexe change dans le temps et est liée à la conversion, à travers TR, du génome envahir dans une hélice ADN double.
L'intégration du génome du virus à celle de la cellule dépendra de la capacité du génome viral à pénétrer le noyau hôte. La réorganisation du VNC a une importation importante dans l'importation dans le noyau, bien que des protéines cellulaires importantes, telles que TransportIn-SR2 / TNPO3, importtin-alpha3 et importin7 influencent également le noyau.
Peut vous servir: caractéristiques des êtres vivantsLes protéines virales, telles que l'intégration, et les facteurs de transcription de la cellule hôte, tels que LEDCF, sont essentiels dans l'intégration du génome viral.
Cela utilise la machinerie de la cellule hôte pour transcrire et traduire des protéines virales et pour assembler les virions, les libérant dans l'espace extracellulaire.
Du lentivirus à la lentivector
Le génome du rétrovirus a trois cadres de lectures ouvertes (MLA) pour différents éléments viraux. Par exemple, Capsidia et Matrix (Gen gag), enzymes (gen Pol), et envelopper (gen envoyer).
La construction d'un vecteur viral consiste en l'élimination de certains gènes de virus sauvage, tels que ceux liés à la virulence. De cette façon, un vecteur viral peut infecter les cellules eucaryotes, rétro-transcriptions, s'intégrer dans le génome de la cellule eucaryot hôte et exprimer le transgen (génération thérapeutique insérée) sans causer de maladie.
Une méthode de construction du lentivecteur est la transfection transitionnelle. Il est basé sur l'utilisation de minigénomas viraux (appelés constructions) qui ne transportent que les gènes d'intérêt. La transfection transitionnelle se compose d'une construction indépendante de constructions.
Certains rétroVectors n'ont que des éléments principaux pour l'assemblage des particules virales, appelées rétrovecteurs non fonctionnels. Ils sont utilisés pour transfecter les cellules d'emballage.
Les vecteurs avec une cassette d'expression de transgen sont capables d'infecter, de transformer les cellules (transduction) et d'exprimer transgen.
L'utilisation de constructions distinctes vise à éviter les événements de recombinaison qui pourraient restaurer le phénotype sauvage.
Technologie lentivector
La technologie lentivector a une large utilisation dans la biologie de base et les études de translation pour la surexpression des transgènes stable, l'édition des gènes dirigée par le site, le silence des gènes persistants, la modification des cellules souches, la génération d'animaux transgéniques et l'induction de cellules pluripotentes.
Peut vous servir: qu'est-ce que l'orththogenèse?Les lentivecteurs constituent des systèmes faciles à manipuler et à produire. Ils sont intégrés irréversibles et sûrement le génome de l'hôte. Infecter les cellules qui sont ou non en division.
Ils montrent un tropisme envers certains tissus, facilitant la thérapie. Ils n'expriment pas de protéines virales, ils ont donc une faible immunogénicité. Ils peuvent envoyer des éléments génétiques complexes.
Dans la recherche fondamentale, les lentivecteurs à base de VIH ont été utilisés comme systèmes d'envoi d'ARN d'interférence (ARNi) pour éliminer la fonction d'un gène spécifique, permettant ainsi d'étudier l'interaction avec des autres différents.
Lentivecteur obtenu à partir du VIH
Au début des années 90, les premiers lentivecteurs ont été construits à partir du HVI-1, qui est étroitement lié au SIV de Chimpanzee. HVI-1 est responsable du SIDA dans le monde entier.
La première génération de lentivector a une partie importante du génome du VIH. Comprend les gènes Fille et Pol, et plusieurs protéines virales supplémentaires. Cette génération a été créée à l'aide de deux constructions. L'un d'eux, qui exprime le navire, fournit des fonctions d'emballage. Un autre exprime tout le MLA, à l'exception de l'expédition.
Le vecteur de transfert se compose d'une cassette d'expression marquée par deux types de longues répétitions (LTR) et des gènes nécessaires à l'emballage et à la transcription inversée.
La deuxième génération de vecteurs d'emballage manque la plupart des gènes accessoires et conserve Tat et Rev. Ces gènes ont été supprimés dans la troisième génération et fournis par une quatrième construction.
Les vecteurs de transfert de troisième génération sont composés de deux constructions d'emballage. Un encoder Fille et Pol. Un autre cod Tour. Une troisième construction code pour l'enveloppe, qui est dérivée de VSV-G. Celui qui code le gène d'intérêt contient des séquences inactivées de LTT LTT pour éviter la recombinaison.
Peut vous servir: qu'est-ce que la nomenclature binomiale?Dans le dernier cas, les éléments régulateurs de la transcription augmentent les performances des gènes de transfert.
Lentivecteur obtenu à partir d'autres virus
Le virus du VIH-2 est étroitement lié au Magabey Gris Siv (SIVVOUS), et est responsable du sida en Afrique de l'Ouest. De ce virus, des vecteurs de première et deuxième génération ont été obtenus.
Similaire à HVI-1, du SIVVOUS, de l'EIAV (virus de l'anémie infectieuse), de la FIV (virus d'immunodéficience félin) et du BIV (Virus d'immunodéficience bovine (BIV) de trois générations ont été construits. Des vecteurs à base d'EIAV ont été développés pour une utilisation clinique.
Du virus de l'arthrite-idéphalite Caprine (CAEV), des vecteurs de première et troisième génération ont été construits. Tandis que de l'IVR du singe vert africain, les vecteurs de première génération ont été construits.
Les références
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- « Apparence de la triade didactique, concept, composants
- Reproduction des phases et des virus caractéristiques »