Néfelométrie

Qu'est-ce que la néfelométrie?

La Néfelométrie Il se compose de la mesure du rayonnement causé par les particules (en dissolution ou en suspension), mesurant ainsi la puissance du rayonnement dispersé à un angle autre que celui de la direction de l'incident de l'incident.

Lorsqu'une particule en suspension est atteinte par un faisceau de lumière, il y a une partie de la lumière qui est réfléchie, une autre partie est absorbée, un autre déviant et le reste est transmis. C'est pourquoi lorsque la lumière frappe un milieu transparent dans lequel il y a une suspension de particules solides, la suspension est observée trouble.

Qu'est-ce que la néfelométrie?

Dispersion du rayonnement par particules de solution

Au moment où un faisceau de lumière s'affronte contre les particules d'une substance de suspension, la direction de propagation du faisceau change sa direction. Cet effet dépend des aspects suivants:

1. Dimensions des particules (taille et forme).
2. Caractéristiques de la suspension (concentration).
3. Longueur d'onde et intensité de lumière.
4. Distance de la lumière incidente.
5. Angle de détection.
6. Indice de réfraction moyenne.

Néfelomètre

Le néfelomètre est un instrument utilisé pour mesurer les particules en suspension dans un échantillon liquide ou dans un gaz. De sorte qu'une Photocela placée à un angle de 90 ° par rapport à une source de lumière détecte le rayonnement par les particules présentes dans la suspension.

De même, la lumière réfléchie par les particules vers la photo dépend de la densité des particules. Le diagramme 1, présente les composants de base qui composent un néfelomètre:

Figure 1. Composants de base d'un néfelomètre.

POUR. Source de rayonnement

Dans la néfelométrie, il est d'une importance vitale d'avoir une source de rayonnement avec une grande puissance de lumière. Il existe différents types, allant des lampes au xénon et des lampes à vapeur de mercure, des lampes laser laser laser halogènes, du rayonnement laser, entre autres.

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B. Système monochromateur

Ce système est situé entre le rayonnement et la source de seau, de sorte que l'incidence sur le seau de rayonnement avec différentes longueurs d'onde par rapport au rayonnement souhaité est évitée de cette manière.

Sinon, les réactions de fluorescence ou les effets de chauffage dans la solution provoqueraient des écarts par rapport à la mesure.

C. Seau de lecture

C'est un récipient généralement prismatique ou cylindrique, et peut avoir des tailles différentes. Dans ceci est la solution à l'étude.

D. Détecteur

Le détecteur est situé à une distance spécifique (généralement très proche du seau) et est responsable de la détection du rayonnement dispersé par les particules de suspension.

ET. Système de lecture

Il s'agit généralement d'une machine électronique qui reçoit, convertit et traite les données, qui dans ce cas sont les mesures obtenues à partir de l'étude réalisée.

Déviations

Toute mesure est soumise à un pourcentage d'erreur, qui est principalement donné par:

• Seaux contaminés: Dans les seaux tout agent externe à la solution à l'étude, qui est à l'intérieur ou à l'extérieur du seau, diminue la lumière rayonnante sur le chemin du détecteur (seaux défectueux, poussière attachée aux parois du seau).
• Ingérence: La présence de certains contaminants microbiens ou turbidité disperse l'énergie rayonnante, augmentant l'intensité de la dispersion.
• Composés fluorescents: Ce sont ces composés qui, lorsqu'ils sont excités par le rayonnement incident, provoquent des lectures erronées et élevées de la densité de dispersion.
• Conservation des réactifs: La température inadéquate du système pourrait provoquer des conditions défavorables à l'étude et inciter à la présence de réactifs troubles ou précipités.
• Fluctuations de l'énergie électrique: Pour éviter que le rayonnement incident d'être une source d'erreur, des stabilisateurs de tension sont recommandés pour un rayonnement uniforme.

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Caractéristiques métrologiques

Étant donné que la puissance rayonnante du rayonnement détecté est directement proportionnelle à la concentration de masse des particules, les études néfélométriques possèdent - en théorie - une plus grande sensibilité métrologique que d'autres méthodes similaires (telles que la turbidimétrie).

De plus, cette technique nécessite des solutions diluées. Cela permet de minimiser les phénomènes d'absorption et de réflexion.

Applications de néphélométrie

Les études néfelométriques occupent une position très importante dans les laboratoires cliniques. Les applications vont de la détermination des immunoglobulines et de la phase aiguë, des protéines de complément et de coagulation.

Détection du complexe immunitaire

Lorsqu'un échantillon biologique contient un antigène d'intérêt, il est mélangé (dans une solution tampon) avec un anticorps pour former un complexe immunitaire.

La néfelométrie mesure la quantité de lumière dispersée par la réaction antigène-anticorps (AG-AC), et de cette manière les complexes immunitaires sont détectés.

Cette étude peut être réalisée par deux méthodes:

Néphélométrie du point final:

Cette technique peut être utilisée pour l'analyse du point final, dans lequel l'anticorps de l'échantillon biologique étudié est incubé pendant vingt-quatre heures.

Le complexe AG-AC est mesuré à l'aide d'un néfelomètre et la quantité de lumière dispersée est comparée à la même mesure effectuée avant la formation du complexe.

Néfelométrie cinétique

Dans cette méthode, le taux de formation complexe est surveillé en continu. La vitesse de réaction dépend de la concentration de l'antigène de l'échantillon. Ici, les mesures sont prises en fonction du temps, donc la première mesure est prise au moment "zéro" (t = 0).

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La néfelométrie cinétique est la technique la plus utilisée, car l'étude peut être réalisée en 1 heure, par rapport à la longue période de la méthode du point final. Le rapport de dispersion est mesuré juste après avoir ajouté le réactif.

Par conséquent, à condition que le réactif soit constant, la quantité de l'antigène présent est considérée comme directement proportionnelle au rapport de changement.

Autres applications

La néfelométrie est généralement utilisée dans l'analyse de la qualité chimique de l'eau, pour la détermination de la clarté et pour contrôler les processus de son traitement.

Il est également utilisé pour mesurer la pollution atmosphérique, dans laquelle la concentration de particules est déterminée à partir de la dispersion qu'ils produisent dans une lumière incidente.