Caractéristiques de chromatographie de la couche fine, à quoi sert-elle

La Chromatographie sur couche mince C'est une méthode qui permet la séparation et l'identification des substances présentes dans un mélange. La «fine couche» so-appelée est formée par du gel de silice (oxyde de silicium), de l'alumine (oxyde d'aluminium) et de la cellulose. Cependant, d'autres préparations pour certaines applications peuvent être utilisées.

Ils sont utilisés comme supports de couche fine: verre en verre, en aluminium ou en plastique. Le matériau qui forme la couche fine sert de phase stationnaire de la chromatographie, c'est-à-dire celle qui reste fixe; tandis que le solvant ou le mélange de solvants utilisés constituent la phase mobile, qui se déplace avec les substances à séparer.

La chromatographie sur papier est un type rudimentaire de chromatographie de couche fine. Source: Aucun auteur lisible par machine fourni. Dubaj ~ Commonswiki a supposé (sur la base des réclamations du droit d'auteur). / Domaine public

La chromatographie sur papier est régie par le même principe de la chromatographie de la couche fine. Le papier devient la «fine» phase stationnaire, dont la résolution n'est pas comparée à celle obtenue en utilisant les autres variantes de cette technique.

La distance atteinte par les substances dans une chromatographie de couche fine (voir les taches colorées) dépend de la polarité de la phase stationnaire, de la polarité du solvant (phase mobile) et de la polarité des substances.

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Caractéristiques de la chromatographie de la couche fine

Généralités

La chromatographie sur la couche fine est essentiellement une méthode analytique. Par conséquent, de très petites quantités de substances à analyser sont utilisées.

Les feuilles de chromatographie de couche fine ont un soutien rigide au verre, en aluminium ou en cellulose, sur lequel le matériau utilisé pour la phase stationnaire est placé. Cela dépend des objectifs à atteindre avec la chromatographie.

Parmi les matériaux utilisés dans la chromatographie sur une couche fine, il y a: la silice de silice ou de silice, de l'alumine (oxyde d'aluminium), de la cellulose ou du silicate de magnésium.

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La chambre de chromatographie se compose d'un récipient précipité ou d'un cylindre en verre, qui est placé un couvercle en verre qui ferme la caméra de manière hermétique, évitant ainsi l'évasion des vapeurs des solvants utilisés dans la chromatographie.

La feuille de chromatographie est placée verticalement dans la chambre de chromatographie, reposant sur sa base. La hauteur des solvants dans la chambre de chromatographie est généralement de 1 cm.

Développement

La chromatographie sur la couche fine consiste en une phase stationnaire et une phase mobile. La phase stationnaire est le matériau utilisé pour effectuer une chromatographie, par exemple, gel de silice. Ce matériau est polaire et est utilisé, entre autres utilisations, dans l'analyse des stéroïdes et des acides aminés.

La phase mobile est constituée d'un mélange de solvants, généralement volatile et organique. Un mélange de solvants très utilisé est celui de l'acétate d'éthyle et d'hexane.

Le solvant équivaut à la capillarité sur la phase stationnaire, établissant une concurrence entre les substances soumises à la chromatographie et les solvants de la phase mobile par des sites de la phase stationnaire.

Si la phase syllabe du gel syllique (polaire) est utilisée comme phase stationnaire, les substances polaires interagissent avec elle et atteignent un petit déplacement pendant la chromatographie. Pendant ce temps, les substances non polaires auront un déplacement beaucoup plus important pendant la chromatographie en interagissant efficacement avec la silice en gel.

Révélé et analyse du résultat

La chromatographie est terminée lorsque le solvant atteint une hauteur appropriée qui n'atteint pas la hauteur de la feuille de chromatographie. La feuille de chromatographie de chambre est supprimée et le front de solvant est marqué d'une ligne.

L'emplacement des substances dans une chromatographie sur une couche fine peut être visualisé par plusieurs méthodes, notamment une visualisation directe avec une lumière ultraviolette, l'utilisation de la lumière ultraviolette dans les feuilles traitées au phosphore ou la soumission de feuilles avec des vapeurs d'iode, etc.

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Dans l'identification et la caractérisation des différentes substances, le facteur de rétention (RF) SO. Rf = distance atteinte par une substance / distance atteinte par le solvant.

La valeur de RF est typique de chaque substance pour un certain mélange de solvants de la phase mobile, ainsi que du type de phase stationnaire.

Qu'est-ce que la chromatographie de la couche fine pour?

La chromatographie de couche fine sert à identifier les différentes substances qui font partie d'un mélange. Par exemple: vous pouvez connaître les acides aminés gratuits présents dans le lait ou dans d'autres matériaux.

La chromatographie de couche fine peut identifier le type de lipides présents dans un aliment. Il est également utilisé pour connaître le degré de développement d'une réaction de chimie organique, établissant la présence de réactifs et de produits à différents stades de la chromatographie.

Procédure

Premier pas

Le mélange de solvants est placé dans la chambre de chromatographie, en utilisant un volume tel que sa hauteur atteint environ 1 cm.

Deuxième pas

Il est pratique avant de démarrer la chromatographie, fermer étroitement la caméra et laisser les vapeurs des solvants saturer l'air de celui-ci.

Troisième étape

Une ligne est faite avec un crayon graphite à une hauteur de 1.5 cm à partir d'une extrémité de la feuille de chromatographie. Des échantillons à utiliser en chromatographie sont placés sur la ligne par le capillaire en verre.

Quatrième étape

Par la suite, la feuille de chromatographie avec les échantillons à analyser est placée dans la caméra et la ferme avec le placement du couvercle en verre.

Cinquième étape

L'essor du mélange de solvants est observé jusqu'à ce que le front du solvant atteigne une hauteur d'environ 2 cm de moins que la feuille de chromatographie. Ensuite, la feuille de chromatographie de chambre est extraite et le front de solvant avec une ligne est marqué dedans.

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Sixième étape

La feuille est placée dans un poêle pour le séchage et les substances présentes dans la chromatographie sont analysées en utilisant une méthode de visualisation générale ou un spécifique pour la chromatographie.

Septième étape

Les valeurs RF sont obtenues pour les différentes substances présentes, et sur la base des contrôles de chromatographie, ainsi que de la bibliographie à cet égard, l'identification des substances est identifiée.

Dans la vidéo suivante, ce qui explique ici est résumé de manière simple:

Applications

La chromatographie de couche fine permet de réaliser l'analyse suivante:

-Composants d'un médicament

-Présence de différents métabolites dans les fluides corporels

-Détermination de la pureté d'une substance spécifique

-Coloration, arôme et identification des édulcorants dans l'industrie alimentaire

-Détermination de l'état de développement d'une réaction de chimie organique

Le développement de la méthode HPTLC (chromatographie par couche fine finale) a considérablement augmenté le potentiel de la chromatographie de la couche fine en automatisant son utilisation. Par exemple: dans le placement de l'échantillon, son développement et dans l'analyse.

Cela a transformé le HPTLC en l'une des méthodes les plus utilisées de l'analyse réalisée dans les domaines de la pharmaceutique, de la biochimie, de la cosmétologie, de la nourriture, des médicaments et de l'environnement.

Les références

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