Cetrimarded cetima ce qui est, fondation, préparation, utilise

Il Gémide de Cetimida O Cetrimide est un milieu de culture solide sélectif, conçu pour l'isolement de Pseudomonas aeruginosa. Il est basé sur la mise en évidence de la production de pigments caractéristiques de cette espèce et a été élaboré à partir de la modification de l'agar technologique, créée par King, Ward et Raney.

La formule d'origine contenait des sels de chlorure de magnésium, de sulfate de potassium, de gélatine pancréatique et de digestion d'agar-agar. La modification de la formule consistait en l'agrégat de cetrimide.

Cetimida était d'accord avec Aeruginosa Pseudomonas

L'agar cetrimardée est utile pour l'étude microbiologique des échantillons où la présence de Pseudomonas aeruginosa. Il convient de noter que cette bactérie est de la plus haute importance, car bien qu'elle fasse partie du microbiote environnemental normal, il se comporte souvent comme un agent pathogène opportuniste.

Par conséquent, l'un des problèmes les plus courants provenant de ce germe sont les infections nosocomiales, c'est-à-dire celles qui se produisent dans l'environnement hospitalier, attaquant les patients qui ont un système immunitaire déprimé.

D'un autre côté, en raison de l'affinité que ce micro-organisme a avec l'humidité, les cibles de pollution les plus vulnérables sont les suivantes: équipements respiratoires assistés, médicaments, nébuliseurs, sources d'eau, climatiseurs, désinfectants, solutions de savon, solutions injectables, plaies ouvertes, cathéters, sondes urinaires, entre autres.

En ce sens, l'agar ketime est utile pour les contrôles et les cultures microbiologiques aux éléments précédemment nommés.

Base

Cetridence est basée sur la capacité des moyens de favoriser la croissance de P. aeruginosa, stimuler la production de leurs pigments et inhiber à son tour la croissance d'autres micro-organismes.

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Ces propriétés sont dues à la fonction que chacun de ses composants remplit. La gélatine actuelle peptone sert de source d'azote, de vitamines et de minéraux. Le glycérol ou la glycérine travaille comme source de carbone.

D'un autre côté, cetrimide P. aeruginosa, y compris d'autres espèces appartenant au même genre.

L'inhibition se produit parce que le ketramid agit comme un détergent cationique, en parvenant à déstabiliser la membrane plasmique de la plupart des bactéries, sauf pour P. aeruginosa Et quelques autres qui parviennent à survivre.

D'un autre côté, il contient du chlorure de magnésium et du sulfate de potassium. Ces composés stimulent l'expression phénotypique liée à la capacité de Pseudomonas aeruginosa pour produire divers pigments, notamment: piocyanine, pioverdine, piorrubine, piomélanine et fluorescéine. Enfin, il contient de l'agar -agar, ce qui vous donne la cohérence solide.

Interprétation

L'interprétation de la croissance obtenue dans cette gélose est réalisée comme suit:

L'observation de bords ronds, lisses et réguliers, avec la production de pigments bleu-vert, vert, brun ou rougeâtre, ainsi que l'émission de l'odeur des fruits (aminoacétofénone), est un résultat présumé de la présence de cette bactérie dans cet échantillon.

D'un autre côté, il est indicatif de P. aeruginosa L'observation d'un pigment jaune brillant sur les colonies lorsque la plaque est exposée à la lumière ultraviolette.

Fluorescence des colonies de p. Aeruginosa dans la gélose de Cetimida sous la lumière ultraviolette.

Il convient de noter que chaque couleur observée est due à la production d'un pigment spécifique. Le pigment bleu-vert correspond à la production de piocyanine, le vert à Pioverdina, le rougeâtre à piorrubine, le brun à la piomelanine et la fluorescence jaune-green sous la lumière verdâtre vif sous la lumière ultraviolette à la fluorescéine.

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préparation

Peser 43 GR de milieu déshydraté et se dissoudre dans l'eau distillée. Ajouter 10 ml de glycérol. Emmenez le mélange à une source de chaleur. Laissez-le bouillir pendant quelques minutes jusqu'à la solution complète.

Autoclave à 121 ° C pendant 15 minutes. Laisser reposer et servir sur des plaques stériles de Petri lorsque la température est à environ 50 ° C.

Laisser solidifier, investir, commander dans des plaquettes et économiser au réfrigérateur jusqu'à utiliser. Pour semer les plaques de gélose en hauteur, ils doivent être retirés du réfrigérateur à l'avance et le laisser prendre une température ambiante.

Le pH final du milieu doit être à 7,2 ± 0,2.

La couleur du milieu déshydraté est beige et la préparation est un blanc opaque.

Applications

Dans l'agar ketime, toutes sortes d'échantillons peuvent être semés dans lesquels la présence de Pseudomonas aeruginosa. Par conséquent, il est utile dans tous les domaines de la microbiologie (environnement, industriel, clinique, eau et alimentation).

Il est d'une grande importance pour analyser les environnements hospitaliers et donc être en mesure d'appliquer les supports correctifs, car ce micro-organisme atteint les patients par l'équipement, les médicaments, les solutions et les fournitures contaminées utilisées par le patient.

De cette façon, le micro-organisme peut infecter les voies respiratoires inférieures, les voies urinaires et les blessures des patients immunodéprimés.

Vous pouvez également faire des comptes de colonies de P. aeruginosa Dans les tests de limite microbienne.

Semé

L'agar en cetimé peut être utilisée comme culture primaire. La plaque est inoculée à l'un de ses bords et à partir de là, il est distribué par épuisement au reste de la plaque. Des échantillons liquides peuvent être semés par surface avec spatule Drigalski.

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Les plaques sont incubées dans une aérobiose à 37 ° C pendant 24 heures d'incubation.

Limites

-Un petit pourcentage de souches de  Pseudomonas aéross Ne produisez pas de piocyanine, donc un faux négatif peut être interprété.

-Certaines espèces de pseudomonas d'importance clinique sont inhibées dans ce milieu.

-Malgré l'observation des caractéristiques décrites à Pseudomonas aeruginosa, Ils doivent être corroborés avec des tests d'identification supplémentaires. Un essai qui ne devrait pas manquer est le test oxydase, il doit donner positif.

-Certaines entérobactéries peuvent se développer dans ce milieu et développer un pigment jaune, mais diffère de Pseudomonas aeruginosa en ce que lors de la soumission de l'assiette à la lumière ultraviolette, il n'y a pas de fluorescence.

-Serratia marcescens parvient à développer et à produire un pigment rose.

-Si les plaques de gélose cétrimide sont exposées pendant un certain temps à température ambiante, les souches de P. aeruginosa Ils peuvent perdre la fluorescence observée sous la lumière ultraviolette, mais la propriété est récupérée si elle est incubée à 37 ° C.

Contrôle de qualité

Pour analyser le bon fonctionnement de la gélose en hecine, des contrôles peuvent être utilisés, tels que: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 et Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Les résultats attendus sont:

• Pour P. aeruginosa Bonne croissance, avec un pigment bleu-vert et une fluorescéine positive.
• S. Maltophilie et S. aureus Ils seront partiellement inhibés.
• Il est prévu que Escherichia coli être complètement inhibé.

Les références

1. Laboratoires britanniques. Chef Cetrimida. Disponible sur: Britanialab.com
2. Laboratoires BD. Agar pseudosel BD (gélose de cetrimide). Disponible sur: BD.com