Bilis agarc

Il Bilis agulina C'est un milieu de culture solide sélective et différentielle. Il est utilisé comme test de diagnostic pour déterminer la capacité d'un certain micro-organisme de croissance dans un milieu qui contient de la bile et décomposant également la sculine glycoside dans la sculptine et le glucose.

Ce test de diagnostic est utilisé pour différencier les espèces du genre Streptococcus appartenant au groupe D (Bile Sculpt Positive), des autres groupes de Streptococcus qui réagissent négativement devant ce test.

Bilis Bilis Plate, sembrate avec une souche entérococcus (test positif). Source: Aucun auteur lisible par machine fourni. Philippinjl a supposé (sur la base des réclamations du droit d'auteur). [Domaine public]

Il convient de noter que certains streptocoques du groupe Viridans peuvent hydrolyz.

D'un autre côté, la bile moyenne est également utile pour le diagnostic de Listeria monocytogenes ou espèces de Aerococcus sp, Puisque ces micro-organismes sont une bile de sculpture positive.

La gélose de la bile sculptée est composée de peptone, d'extrait de viande, de bile de bœuf, de sculpture, de citrate de fer, d'agar et d'eau distillée. Certaines maisons commerciales incluent le sodium azida dans la composition du milieu.

Le milieu peut être préparé en laboratoire si vous avez tous les composés séparément ou si vous pouvez être préparé à partir de l'environnement commercial déshydraté.

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Base

Le milieu sculpton contient des peptones et de l'extrait de viande, les deux composés fournissent les substances nutritionnelles nécessaires pour la croissance des micro-organismes.

Il contient également de la sculline; Ce composé est un glucó formé par l'union d'un simple monosaccharide (glucose) avec un composé appelé 6.7-dihydroxymarine ou une coquine (agluconon), avec une liaison acétale ou glucosidique.

Le test est basé sur la démonstration de si les bactéries sont capables d'hydrolyz. Si cela se produit, la sculpture est décomposée en scups et en glucose. La sculétine réagit avec le fer présent au milieu, formant un composé brun foncé, presque noir.

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Cela signifie que le citrate ferrique agit comme un développeur réactionnel. Cette fonction fait de la gélose de la bile de sculpture un milieu différentiel.

D'un autre côté, la bile est un inhibiteur qui empêche la croissance de certains micro-organismes, par conséquent, les bactéries avant le déploiement de la sculline doivent être en mesure de se développer en présence de bile. Par conséquent, ce milieu est considéré comme sélectif.

Les bactéries qui peuvent se développer dans cet environnement sont principalement celles qui vivent dans l'environnement intestinal.

En ce sens, certaines maisons commerciales s'ajoutent au milieu azide de sodium pour inhiber en outre la croissance des bacilles à Gram négatif, augmentant la sélectivité du milieu pour la croissance de Streptococcus.

Enfin, l'agar donne la cohérence solide à l'environnement et l'eau est le solvant des composés.

préparation

Préparation de la sculpture de la bile maison

Peser:

5 g de peptones

3 g d'extrait de viande

40 g de bile de bœuf

1 g de sculpture

0,5 GR de citrate de fer

15 g d'agar

1000 ml d'eau distillée

En cas d'ajout d'azide de sodium.

Dissoudre les composants dans le litre de l'eau distillée, chauffer jusqu'à ce que les composés se dissolvent dans son intégralité. Distribuez 5 ml dans des tubes à essai avec un couvercle de filetage 16 x 125 mm. Autoclavar à 121 ° C, 15 livres pendant 15 minutes.

Retirer de l'autoclave et incliner les tubes sur un support, de sorte que l'agar se solidifie dans un large pic de flûte.

Gardez au réfrigérateur jusqu'à utiliser. Apportez à température ambiante avant de semer.

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Vous pouvez également préparer des plaques de sculpture biliaire biliaire; Dans ce cas, tout le mélange est une autoclave dans un Felola et ensuite distribué dans des plaques stériles de Petri. Ils se laissent se solidifier et rester au réfrigérateur.

Le pH moyen doit être 6.6 ± 0,2.

Préparation du Bilis Agulina à partir d'un média commercial

Peser la quantité spécifiée par l'insert. Cela peut varier d'une maison commerciale à une autre. Par la suite, continuez égal à la procédure expliquée ci-dessus.

Le pH moyen doit être de 6,6 ± 0,2. La couleur du milieu déshydraté est beige clair et le milieu préparé est ambre foncé.

Half Bile Commercial Sculpt. Source: Photo prise par l'auteur MSC. Marielsa Gil.

Applications

Le milieu sculptique est principalement utilisé pour différencier le streptocoque du groupe D (bile de sculpture positive), du reste des groupes streptocoques (bile de sculpture négative).

Si le test de croissance est combiné dans un bouillon hypersalisé avec le test de la bile de sculpture, l'identification d'un groupe Streptococcus spécial du groupe D appelé Enterococcus peut être identifié.

Ce groupe spécial Streptococcus appartient au groupe D du genre mentionné et est capable d'hydrolyz à 6,5% de sodium), propriété qui fait la différence.

Par conséquent, le streptocoque qui hydrolyz.

Semé

Inoculer le milieu de préférence à partir d'un bouillon pur de 24 heures de Todd-Hewitt.

Ajouter 2 gouttes sur la surface moyenne avec une pipette pasteur et s'étendre au milieu avec une poignée en platine.

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Incuber à 35 ° C pendant 48 heures, tandis que le temps d'incubation est rempli, il peut être surveillé pour voir s'il y a une réaction positive. Si à la fin des temps, la réaction reste négative peut être incubée jusqu'à terminer 72 heures.

Interprétation

Réaction positive: Aspect d'une couleur brun foncé, presque noir dans le pic de flûte (en cas de test de tube) ou noircissement de l'agar autour des colonies (en cas de test de plaque).

Réaction négative: Il n'y a pas de noircissement du milieu ou il y a l'apparence d'une couleur noire dans moins de la moitié du tube après 72 heures d'incubation. D'un autre côté, la croissance bactérienne au milieu sans l'apparition de la couleur noire doit être considérée comme un test négatif.

Contrôle de qualité

Pour évaluer la qualité du milieu, une souche de Enterococcus faecalis ATCC 29212 comme contrôle positif et une souche de streptocococus n'appartenant pas au groupe D comme contrôle négatif.

Limites

-Les milieux qui ne contiennent pas d'azide de sodium permettent la croissance des bacilles à Gram négatif. Certains d'entre eux peuvent blacke le médium.

- Certaines maisons commerciales ajoutent une faible concentration en bile (10%) et pour cette raison, certains streptocoques qui n'appartiennent pas au groupe D peuvent se développer dans l'environnement et hydrolyser la sculine, qui peut générer des erreurs dans l'interprétation.

Les références

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