Types de culture des bactéries, caractéristiques, méthodes, exigences

UN Culture des bactéries C'est le résultat de la plantation de ces micro-organismes sur des moyens nutritionnels, de sorte qu'ils sont reproduits, conduisant à l'apparition de colonies bactériennes dans les milieux solides et la turbidité dans les milieux liquides.

La méthode semée est très importante pour pouvoir distribuer l'inoculum de telle manière que les bactéries présentes sont dispersées et peuvent développer des colonies dûment isolées.

Diverses cultures plantées par l'auteur du Laboratoire de bactériologie du bâtiment des sciences biomédicales et technologiques, Université de Carabobo. Source: Composition de photos prises par l'auteur MSC. Marielsa Gil.

Les colonies obtenues dans l'environnement de culture solide sont la conséquence de la prolifération du micro-organisme qui a été semé. Chaque colonie commence à partir d'une seule bactérie, qui peut être multipliée de façon exponentielle pour former une population macroscopiquement visible.

Il se produit également dans les cultures liquides, mais dans ce cas, la croissance bactérienne est observée par turbidité. 

Une croissance bactérienne est possible lorsque le milieu de culture rassemble les conditions nutritionnelles et pH nécessaires au développement d'une bactérie particulière. De plus, il est nécessaire de contrôler d'autres variables, telles que la température, le temps d'incubation, la concentration en oxygène, le CO₂, entre autres.

Toutes les populations bactériennes n'ont pas besoin des mêmes exigences, bien que certaines puissent être courantes pour presque toutes, comme que le milieu contient des peptones, il est également vrai qu'il existe des micro-organismes plus exigeants qui nécessitent en outre d'autres substances spécifiques, appelées facteurs de croissance.

Par exemple, on peut mentionner que certains Haemophilus Pour croître, ils ont besoin de la présence du facteur X (Hemina) et du facteur V (NAD).

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Types de cultures bactériennes

Les cultures bactériennes peuvent être polymicrobiennes, pures ou mixtes.

Cultures bactériennes polymicrobiennes

Les cultures polymicrobiennes sont celles qui proviennent de la plantation d'un échantillon obtenu à partir d'un endroit qui a un microbiote normal, dans lequel un certain pathogène peut également être trouvé.

Exemple: Lorsqu'une culture pharyngée d'exsudat se développe, un agent pathogène peut être trouvé comme le Streptococcus pyogenes, Mais il sera accompagné d'un microbiote habituel de la région.

Dans ce cas, une bonne strmination qui permet la croissance des différents types de bactéries présentes isolément est indispensable.

La colonie qui a des caractéristiques compatibles avec une souche de Streptococcus pyogenes, Il sera soigneusement touché par la poignée de platine, puis le semera dans un milieu de culture vierge et obtiendra ainsi une culture pure de ce micro-organisisme.

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De cette culture pure, tous les tests requis pour l'identification des bactéries peuvent être effectués.

Culture bactérienne pure

Afin d'identifier efficacement un micro-organisme, vous devez travailler à partir d'une culture pure.

Les cultures pures peuvent être obtenues comme dans le cas de l'exemple précédent en raison du remède d'une colonie isolée d'une culture polymicrobienne, ou lorsqu'un échantillon est semé qui vient d'un endroit normalement stérile et il n'y a qu'un seul pathogène (un - croissance d'un type de bactéries à croissance unique). Exemple: lorsqu'un patient atteint de méningite bactérienne est semé.

Une autre façon est quand il est re-géré d'une vieille culture pure pour obtenir une récolte renouvelée pure.

Cultures bactériennes mixtes

Ces cultures sont composées d'un mélange de micro-organismes, comme présenté dans la nature. Dans certains processus industriels, l'utilisation de cultures mixtes est pratique.

Il peut être obtenu par l'union de plusieurs cultures pures, car elles permettent l'étude des interrelations bactériennes.

Ils sont utiles par exemple dans la dégradation des xénobiotiques dans les eaux usées industrielles, car ils agissent comme des biodégrateurs.

Caractéristiques des cultures bactériennes

Les caractéristiques morphologiques des colonies obtenues dans les cultures bactériennes peuvent être très variées.

Les colonies peuvent être très petites, modérées ou grandes et leur apparence peut être sèche ou mucoïde, lumineuse ou opaque. Selon la texture, elle peut varier entre Lisa et Rosy.

Selon la couleur qu'ils peuvent être: incolore, blanc, jaune, rose, fuchsias, rouge, orange, beige, grisâtre, verdâtre, brun, noir ou avec une luminosité métallique, selon les bactéries impliquées et le milieu de culture utilisé.

Les bords des colonies peuvent être réguliers ou irréguliers. D'autres, en revanche, peuvent présenter un film uniforme qui est distribué dans presque tout le support appelé "grouper". Ceci est caractéristique de Proteus sp.

Certaines cultures bactériennes émettent des odeurs assez caractéristiques des espèces impliquées. Par exemple, une culture de Pseudomonas aeruginosa Il a une odeur caractéristique de fruits, tandis que le genre Protéus Présente une odeur pourrie caractéristique.

Exemples de colonies en fonction de leur taille

Extrêmement petit: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Petit: Streptococcus SP, Enterococcus SP.

Modéré: Enterobacteriaceae Famille

Grands: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Exemple de colonies selon leur apparence

SEC: Lactobacillus confusus.

MUCOIDES: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Brillant: Klebsiella pneumoniae.

Opaque: Enterococcus faecalis, Quelques souches de Neisseria gonorrhoeae.

Exemples de colonies selon sa texture

Colonies lisses: Micrococcus luteus

Colonies de rugo: Ventricule sarcina En gélose nutritive.

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Exemple de colonies selon sa forme

Circulaires: Listeria Murrayi et Micrococcus luteus En gélose nutritive.

Planas: Staphylococcus equorum En gélose nutritive.

Convexe: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Exemple de colonies selon leurs bords

Edge arrondi: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Edge irrégulier: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Bords lobés: Bacillus sp.

Exemple de colonies selon leur couleur

Transparent ou incolore: Shigella SP Dans Agar XLD.

Blanc: Staphylococcus hominis Dans la gélose du sang.

Beige: Bacillus sphaericus et Lactobacillus confusus En gélose nutritive.

Jaune: Staphylococcus aureus et Elizabethking méningoseptique Dans la gélose du sang, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus En gélose nutritive,

Rosada: Escherichia coli Dans Agar XLD, Roseus micrococcus En gélose nutritive.

Fuchsia: Escherichia coli Dans Mac Conkey Agar.

Violette: Chromobacterium violaceum.

Rougeâtre: Serratia Mâchoires à température ambiante dans une gélose nutritive.

Orange: Kurthia zopfii En gélose nutritive.

Gris: Sporosarcina ureae Dans la gélose à l'extrait de sol.

Verdâtre: Pseudomonas aeruginosa Dans l'agar Bhi.

Brun: Enterococcus sp Bilis agulina.

Noir: Salmonella enteritidis Dans l'agar SS.

Avec luminosité métallique: Escherichia coli Dans Endo Agar.

Méthodes de culture bactérienne

Culture bactérienne aérobie ou anaérobie facultative

C'est la méthode de culture la plus utilisée. En effet,, en premier lieu, la plupart des bactéries pathogènes pour l'homme sont anaérobies aérobies ou facultatives; Et deuxièmement, il est beaucoup moins cher et plus simple que les cultures anaérobies. Exemple: Mycoplasma pneumoniae et Escherichia coli respectivement.

Culture bactérienne anaérobie

Ce type de culture nécessite la suppression complète de l'oxygène. Les milieux de culture pour les bactéries anaérobies devraient généralement contenir des substances réductrices, telles que: l'acide ascorbique, le thiogLolate, la cystéine ou le sulfure pour éliminer les effets toxiques de l'oxygène contenu dans l'air contenu dans l'air.

Certains contiennent des indicateurs tels que le repos qui en présence d'oxygène sont bleus et en anaérobiose, il est incolore. Exemple: Clostridium tetani.

Culture bactérienne en microaérophilie

Les plaques de culture sont introduites dans une cloche de microaérophilie avec une bougie brûlante, couverte. La bougie consomme de l'oxygène et s'éteint. Dans cette condition, certaines bactéries telles que Streptococcus sp.

Matériaux et exigences

Matériaux

Les matériaux nécessaires pour effectuer une récolte bactérienne sont: plaques de Pétri ou tubes avec culture ou bouillon, poignée en platine, échantillon, briquet bunsen ou poêle.

Exigences pour effectuer une culture de bactéries

La culture des bactéries nécessite de nombreux éléments qui doivent être pris en compte, comme les nutriments de l'environnement, le pH, la température, la concentration en oxygène, le CO2, l'humidité, entre autres.

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Nutriments

Les cultures bactériennes nécessitent des cultures contenant des macro-éléments et des micro-éléments. Parmi les macroéments, des substances organiques telles que les peptones, les acides aminés, les glucides tels que les sources de carbone et d'azote peuvent être mentionnées.

Parmi les micro-éléments figurent des substances inorganiques ou du manganèse, du zinc, du nickel, du bore, du chlore, du sélénium, du silicium, du cobalo, du cuivre, entre autres.

Concentration des ions hydrogène (pH)

La concentration d'ions hydrogène (h⁺) et les oxidrils (oh^-) Au milieu où la culture sera développée, elle est d'une importance vitale, car ils déterminent le pH.

Le pH le plus utilisé est neutre (pH = 7.0), mais il peut y avoir des milieux où un pH acide ou alcalin est pratique, par exemple si vous souhaitez isoler une bactérie acidophile ou alcalophile respectivement.

Température

La température est un facteur très important qui influence la croissance des cultures bactériennes. Les bactéries peuvent être des psychrophiles (ils poussent à des températures < de 20 °C, mesófilas (entre 20 °C y 42 °C), termófilas (40 °C a 70 °C), hipertermófilas (70 °C - 105 °C).

Exigence d'oxygène

Aérobies: ils grandissent en présence d'oxygène.

Microaérophiles: ils se développent en présence de 5 à 10% de CO_2.

Anaérobies strictes: grandit en l'absence d'oxygène.

Anaérobies en option: se développe en présence d'oxygène ou sans lui.

Aérotolantes: ils poussent bien sans oxygène et tolèrent peu d'oxygène.

Média culturel

Les milieux de culture sont des préparations nutritionnelles spéciales qui sont préparées en laboratoire pour obtenir une croissance ou une culture microbienne. Ces moyens varient en cohérence, en composition et en fonction. Chaque laboratoire préparera le type de milieu de culture qui s'adapte à ses besoins.

Collection de cultures bactériennes

Il existe des institutions ou des organisations qui se consacrent à la caractérisation, à l'entretien et à la distribution des souches bactériennes d'importance clinique, environnementale ou industrielle.

Ces souches sont utilisées pour des travaux de recherche et pour effectuer des contrôles de qualité pour les médias de culture.

Exemple: The American Type Culture Collection Strains, Vénézuélian Center for Collection of Microorganisms (CVCM) et les souches de l'Institut national d'hygiène, d'épidémiologie et de microbiologie de Cuba (INHEM), entre autres.

Les références

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